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上海富雨生物
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人或动物
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常温或干冰
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1×10^6cells/T25
人结肠癌细胞带红色荧光SW480+RFP
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种属 |
人 |
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别称 |
SW480+RFP |
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组织来源 |
直肠,结肠 |
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疾病 |
结肠直肠腺癌 |
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传代比例/细胞消化 |
1:2传代,贴壁消化2-3分钟 |
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完全培养基配置 |
Leibovitz's L-15培养基;10%胎牛血清;1%双抗 |
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简介 |
SW480源自一位51岁白人男性患者的原位直肠腺癌 ,而SW620源自同一病人一年后的淋巴结转移灶。该细胞CSAp 和直肠抗原3阴性;角蛋白阳性;p53基因第273位密码子的G→A突变引起Arg→ His替代 ,309位密码子的C→T突变 导致Pro→Ser替代;细胞p53蛋白表达水平升高;癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈 阳性;未检测到癌基因N-myc的表达;不表达Matrilysin(一种与肿瘤侵袭相关的金属蛋白酶)。 |
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形态 |
上皮细胞样 |
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生长特征 |
贴壁生长 |
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倍增时间 |
~30-50h |
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基因表达 |
carcinoembryonic antigen (CEA) 0.7 ng/10^6 cells/10 days; keratin; transforming growth factor beta, myc+; myb + ; ras+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, HLA A2, B8, B17; Blood Type A; Rh +, The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining., The line is positive for expression of c-myc, K- ras, H-ras, N-ras, myb, sis and fos oncogenes. |
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受体表达 |
epidermal growth factor (EGF) |
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致瘤性 |
Yes. Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1 ×10^7 cells. |
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倍增时间 |
每周 2 至 3 次 |
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培养条件 |
气相:空气 ,100% ; 温度:37摄氏度 ,培养箱湿度为70%-80%。 |
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冻存条件 |
冻存液:90%FBS ,DMSO 10%, 或使用非程序冻存液 |
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备注 |
该细胞推荐使用Leibovitz's L-15培养基 ,无二氧化碳培养,该细胞为已经构建好稳定转染RFP的细胞,随细胞传代次 数的增加 ,其RFP荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度,可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。 |
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产品使用 |
仅限于科学研究 ,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
常温细胞收货当天处理方式 1.收到常温细胞后,及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。 2. 镜下观察有无微生物污染现象,拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象, 方便后续 售后处理。 3. 消毒后,更换赠送的完全培养液放置培养箱静止2-3小时。如细胞有多数悬浮细胞需要离心收集 重新接种止培养瓶。 4. 观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代,请根据实际情况决定), 首次传代推荐比例 1:2 到 1:3(按实际收货细胞密度决定,若不确定 可联系技术支持);若细 胞密度不到 80%则可继续培养,注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖;悬浮细胞注意离心所有培养基以收 集细胞。 5. 由于气温,运输等影响造成贴壁细胞漂浮的,请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代 (参考附件),或及时联系技术支持进行指导传代。 贴壁细胞传代:1.从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃; 2.从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液以避免搅动细胞层,前后摇晃容器数次 3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃,向培养瓶中加入预热的胰酶;胰酶量应足以覆盖细胞层 (T25为1ml); 4.将培养容器在室温下孵育约 2分钟(请注意实际孵育时间根据所用细胞系不同而有所差异); 5.在显微镜下观察细胞解离情况;如果解离程度未达 90%,可将孵育时间延长几分钟,每 30 秒 钟检查一次解离情况; 6.细胞解离程度大于等于 90%时,倾斜培养容器,使细胞上液体尽快流尽;加入所用解离剂两倍 体积的预热完全生长培养基;吹打细胞层表面数次,使培养基分散; 7.将细胞转移到15mL 无菌离心管中,以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟 (请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异); 8.用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀,将细胞悬液按照推荐比例稀释,并将适 量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中,把细胞放回培养箱(注:如果使用培养瓶,将其放 入培养箱前应将瓶盖旋松,以便进行充分的气体交换,除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶 盖)。 悬浮细胞传代:将 T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中 1000rpm 离心 5min,收集上清,加 1- 2ml 完全培养基重悬,按 1:2 比例进行比例传代分到新T25瓶中,补充5-185ml/瓶新的完全培养基 , 最后放入细胞培养箱中培养。
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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single-cell transcriptome sequencing data 期刊:MODERN ONCOLOGY,Aug.2023,VOL. 31,No. 16 作者:HU Wu1,WEN Yiqiao2,QIN Jialan1,ZHAO Ying3,ZHANG Tianbiao1 DOI:10.3969 /j.issn.1672-4992.2023.16.003
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