- ￥3500
- 瑾原生物
- JY976
- 2026年01月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
20以上
- 供应商：
深圳市康初源有限公司
- 规格：
1×10⁶cells/T25培养瓶
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种属 |
人 |
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别称 |
SW480+RFP |
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组织来源 |
直肠,结肠 |
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疾病 |
结肠直肠腺癌 |
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传代比例/细胞消化 |
1:2传代,贴壁消化2-3分钟 |
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完全培养基配置 |
Leibovitz's L-15培养基；10%胎牛血清；1%双抗 |
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简介 |
SW480源自一位51岁白人男性患者的原位直肠腺癌 ，而SW620源自同一病人一年后的淋巴结转移灶。该细胞CSAp 和直肠抗原3阴性；角蛋白阳性；p53基因第273位密码子的G→A突变引起Arg→ His替代 ，309位密码子的C→T突变 导致Pro→Ser替代；细胞p53蛋白表达水平升高；癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈 阳性；未检测到癌基因N-myc的表达；不表达Matrilysin（一种与肿瘤侵袭相关的金属蛋白酶）。 |
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形态 |
上皮细胞样 |
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生长特征 |
贴壁生长 |
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倍增时间 |
~30-50h |
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基因表达 |
carcinoembryonic antigen (CEA) 0.7 ng/10^6 cells/10 days; keratin; transforming growth factor beta, myc+; myb + ; ras+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, HLA A2, B8, B17; Blood Type A; Rh +, The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining., The line is positive for expression of c-myc, K- ras, H-ras, N-ras, myb, sis and fos oncogenes. |
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受体表达 |
epidermal growth factor (EGF) |
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致瘤性 |
Yes. Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1 ×10^7 cells. |
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倍增时间 |
每周 2 至 3 次 |
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培养条件 |
气相：空气 ，100% ； 温度：37摄氏度 ，培养箱湿度为70%-80%。 |
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冻存条件 |
冻存液：90%FBS ，DMSO 10%, 或使用非程序冻存液：官网货号JY-H040 |
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备注 |
该细胞推荐使用Leibovitz's L-15培养基 ，无二氧化碳培养,该细胞为已经构建好稳定转染RFP的细胞，随细胞传代次数的增加，其RFP荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度，可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。 |
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产品使用 |
仅限于科学研究 ，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
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文献和实验培养基，待细胞生长良好、细胞密度达30%~40%，每孔加1~2μl 带红色荧光病毒颗粒，轻轻混匀，病毒量不宜过高。8h 左右离心后弃培养基，换上新鲜培养基。2~3d 后在荧光显微镜下观察红色荧光表达情况。 （3）转染率 检测 将生长良好的转染后的胶质瘤干细胞连续多次体外传代，用胰酶制成单细胞悬液，PBS 反复冲洗，在200 倍荧光显微镜［激发波长488nm、发射波长（530±15）nm］下进行RFP 阳性细胞计数。每个样本计数10 个视野，每个视野计数100 个细胞。计算RFP 阳性细胞
诺奖得主 Jennifer 最新研究：CRISPR/Cas12c 无需切割 DNA 就可实现基因沉默，抵御病毒入侵
-crRNA 的处理，如果没有 pre-crRNA 的处理，Cas12c 则无法有效地结合目标 dsDNA。 Cas12c 可以在不触发 DNase 活性的情况下阻断基因表达 前期的研究发现，Cas12c 可以靶向细菌中生存必需的基因，这可能是由于体内 Cas12c 介导的基因组靶点的切割，也可能是 Cas12c 通过靶向聚合酶阻断反应来介导转录沉默。为了探索这些可能性，研究人员利用大肠杆菌开发了一种双色荧光干扰试验，其中编码红色荧光蛋白（RFP）或绿色荧光蛋白（GFP）的报告基因被整合到大肠杆菌基因
lipofectamine2000 给多了，建议降低浓度，例如之前加了 10ul, 现在改成 7.5ul 或者 5ul。还有可能是转染时间太长了，降低转染的时间。 师兄，48H 提蛋白行不行。 答： 可以的，48H（从转染的时刻开始计时）后基因就都表达了，所以是可以的。 如何看转染效率，师兄？ 答：如果你买的是带 GFP，或者 RFP 荧光的质粒或者 siRNA，可以在 48h 后在荧光显微镜下观察，可以用发亮的程度代表转染的效率，但是最终还是要用 PCR 或者 western 验证效率。
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