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文献和实验试剂及配制 1. HRP和兔(或羊)抗HRP:抗HRP用HRP免疫兔(或羊)获得。 2. 0.075mol/L醋酸钠-0.15 mol/L醋酸铵等量混合液 3. 0.1mol/LHCl和0.01mol/LHCl 4. 饱和硫酸铵溶液 5. 0.01mol/L NaOH 操作方法 1. 取兔(或羊)抗HRP血清5ml,16000r/min离心20min,去沉淀; 2. 于收集的上清中加入HRP(2mg/ml)溶液1ml,室温缓慢搅拌1h,同上离心;
/ml)中。 5.在pH计监测下,边搅拌边加0.1Mol/L或0.01Mol/L HCl至pH 2.3。此时沉淀已全部溶解,1.5×10 4 r/min离心20min。 6.吸取上清,用0.1Mol/L NaOH调pH至7.4。 7.量体积,加入1/10容量的0.075Mol/L醋酸钠和0.15Mol/L醋酸铵的等量混合液。 8.逐滴加入等体积的100%饱和硫酸铵,搅拌20min。1.5×10
1g哺乳动物细胞,可以得到约2mg DNA。 试剂与配制 1. 磷酸缓冲液; 2. 酚/氯仿/异戊醇25:24:1; 3. 7.5mol/L醋酸铵; 4. 100%和70%乙醇; 5. TE缓冲液; 6. 消化缓冲液:100mmol/L NaCl、pH8.0 10mmol/L Tris.Cl、pH8.0 25mmol/L EDTA、0.5%SDS、0.1mg/ml蛋白酶K(临用前加入)。 操作方法 1. 标本的制备 A)组织标本的制备:①新鲜的生物
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