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文献和实验摩尔)的对照报告基因酶(图3B),并且这两个酶的特异活力相似。 图2 用双荧光素酶报告基因测试由萤火虫和Renilla荧光素酶产生的发光。CHO细胞(1×106 /60mm培养板)共转染pGL3Control和pRL SV40载体DNA.细胞用PBS洗涤后,加入400μl PLB制成裂解液。将20μl小量细胞裂解液和100μl荧光素酶测试试剂II(LARII)混合,萤火虫荧光素酶的活力立即用荧光照度仪检测(细线示踪)。100μl Stop &GloTM 试剂加入到荧光照度仪管中,湮灭萤火
3basic amp PGL3-control PGL3control amp PGL3-enhancer amp PGL3-promoter amp pRL-TK pRLTK amp pRL-CMV pRLCMV amp pRL-SV40 pRLSV40 amp pRL家族海肾荧光素酶(Rluc)对照报告基因载体系列是设计应用于双荧光素酶报告基因检测系统的。pRL载体提供组成性表达的海肾荧光素酶,可与一个萤火虫荧光素酶载体联合共转染哺乳动物细胞。海肾荧
增强子 pGL3-enhancer 有SV40增强子 研究启动子的调控, 需要做启动子删除分析吧。 xiongran 启动子区域一般包含在转录起始位点上游2kb,下游200bp的区间中,把这段序列拿到后再做一下转录因子结合位点分析。一般问题不大,做启动子删除分析工作量似乎太大! zhao22840718 可以用pGL3-basic 最近promega出的pGl4载体,去除了pGL3骨架上很多转录
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