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- 2026年04月27日
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OBiO和元生物
免疫组库（Immune Repertoire，IR）是指在指定时间，某个体循环系统中所有功能的多样性T细胞和B细胞的总和。在B细胞和T细胞中发现的受体分别被称为B细胞受体（B Cell Receptor，BCR）和T细胞受体（T Cell Receptor，TCR）。免疫组库就是研究BCR和TCR，探究人体免疫机制。
技术流程
①单细胞悬液制备：从目标器官或组织分离活单细胞，需要摸索和调整消化方案，以最大限度地增加细胞数量和细胞质量，同时减少细胞死亡；
②细胞活性检测：对单细胞悬液进行质检，包括细胞活性、细胞直径、细胞数量、结团率和碎片率等；
③单细胞捕获：制备好合格的细胞悬液，凝胶磁珠和油滴分别加入到Chromium Chip A的不同道（共8个道），经由微流体“双十字”交叉系统形成GEM。
④细胞裂解、cDNA反转录及PCR扩增：GEM混合后进行细胞裂解，凝胶珠自动溶解释放大量引物序列，并与细胞裂解液、反应混合物（包含反转录试剂和 poly(dT) 反转录引物）混合，带有polyA 的RNA逆转录产生带有10X Barcode和UMI信息的cDNA；
⑤TCR/BCR区域富集：对全长cDNA分为两份，一份使用5'接头的通用引物进行巢式PCR，此过程加上测序接头P5，实现5‘转录组PCR扩增’；另外一份使用TCR/BCR恒定区的连续巢式引物进行巢式PCR，此过程加上测序接头P5，实现TCR/BCR区域富集；
⑥文库构建：TCR/BCR区域扩增富集完成后酶切片段化，通过控制打断不同长度而最终得到的序列可以覆盖整个V(D)J片段cDNA序列，通过末端修复、加A、接头连接Read2测序引物，PCR构建含有P5和P7接头的V(D)J文库；
⑦上机测序。
技术服务优势
①支持T/B细胞的克隆型研究，从而鉴定免疫细胞的克隆多样性；
②从样本制备到个性化分析，为您提供全方位的服务。
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文献和实验的能力越强，越不容易感染疾病，但超过一定限度，也容易引发自身免疫性疾病。且机体的免疫组库也不是一成不变的，会随着年龄，环境，药物，患病等等因素，免疫组库多样性也时刻处于动态变化当中。由此，将免疫组库测序用于临床诊断和治疗上，有助于对群体或个体间进行免疫监测，探究相关疾病（疾病感染，治疗，自身免疫疾病等）和免疫应答的关系，监测免疫疗法的效果，研究疾病发生、发展的分子机制。简单来说，单细胞免疫组库解决如下问题: 识别免疫组库序列组成和多样性 探究基因表达情况，发现新的生物标志物 分析样本内/样本间
不变的，会随着年龄，环境，药物，患病等等因素，免疫组库多样性也时刻处于动态变化当中。由此，将免疫组库测序用于临床诊断和治疗上，有助于对群体或个体间进行免疫监测，探究相关疾病（疾病感染，治疗，自身免疫疾病等）和免疫应答的关系，监测免疫疗法的效果，研究疾病发生、发展的分子机制。 简单来说，单细胞免疫组库解决如下问题: 识别免疫组库序列组成和多样性 探究基因表达情况，发现新的生物标志物 . 分析样本内/样本间Clonotype组成（如增殖性克隆，细胞类型间clonotype overlap情况
球蛋白库以微调与抗原的相互作用。免疫系统在自身免疫疾病、传染病、癌症等多种疾病中扮演者至关重要的角色，也正因此免疫组库测序一直是多方领域的研究重点，即以 T/B 淋巴细胞为研究目标，对其产生的多样化免疫分子例如膜型免疫分子 BCR 和 TCR、分泌型免疫分子抗体等进行测序研究。新技术 10x 单细胞 V(D)J 的优势传统免疫组库测序利用的是多重 PCR 或 5’RACE 方法，但都存在一定的局限性，如多重 PCR 法扩增范围局限在 CDR3 区、5'RACE 法只能获得单链全长信息等。10x
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