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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 采用 96 孔滤板规格对于 带 GST 标签*的蛋白质进行高通量筛选和平行纯化。
- 不同的孔与孔和板与板之间可产生可再现性非常高的结果。
- 一站式实现高纯度,化学稳定性高。可直接将未澄清的样品上样至孔中。
- 为方便起见,孔中预装有 Glutathione Sepharose 层析填料。
- 使用预装式 GSTrap FF、GSTPrep FF 16/10 和 GSTrap 4B 层析柱可轻松且可预测性地进行工艺放大。
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文献和实验老话说的好,巧妇难为无米之炊,要做好标签蛋白质的纯化实验,首先得选择合适的填料和预装柱,以达到事半功倍的效果。我们今天就来看看 Cytiva 标签蛋白填料的大家族,一起 pick 最适合您蛋白质研究的填料吧! 蛋白标签(Protein Tag) 所谓蛋白标签(Protein Tag)是指利用 DNA 体外重组技术,与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表达、检测、示踪、和纯化等。常用的标签有His、GST、Strep、MBP、Flag 和组合式的双标签。Cytiva 可为
蛋白等) 可以完成一般方法很难完成的分离,如变性和非变性蛋白、功能不同的蛋白的分离 属于一种吸附层析,载量高,具有高效的捕获和浓缩作用。 基本步骤 亲和层析作为一种吸附性层析,主要步骤包括平衡、上样、清洗、洗脱和再平衡步骤 (图10)。由于亲和作用需要在特定的条件下结合和洗脱,亲和层析需要使用特定的结合缓冲液和洗脱缓冲液。 图10 亲和层析的基本步骤 适用性 带有标签的融合蛋白纯化,如His标签蛋白、GST标签蛋白等。 抗体及抗体片段的纯化 其他和某些配基有特异性结合作用的分子的纯化
荧光蛋白-谷丙转氨酶)使用单一亲和层析和两步亲和层析的对比实验。HisTrap HP 纯化结果显示,填料对其它含有暴露的组氨酸残基的蛋白也具有亲和作用。GST 标签与 GSTrap 4B 上的谷胱甘肽配基特异性较高,可以产生较高纯度的蛋白。两个标签组合纯化可以得到最高纯度的蛋白。 双标签绿色荧光蛋白 结语 相比于单标签的一步亲和层析,双标签两步亲和层析可得到更高纯度蛋白。对于不同蛋白,您可以尝试在目的蛋白同侧或两侧,选择不同标签组合进行构建,以提高目的蛋白特异性甚至改善溶解性。 目前,Cytiva
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