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上海暇步康生物生物科技有限公司
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文献和实验蛋白质中多不同靶标的特异性抗体。 抗体芯片是蛋白质芯片中发展最快的芯片,而且在技术上已经日益成熟。美国BDClontech公司推出第一张用于研究的抗体芯片,芯片上排列了378种已知蛋白质的单克隆抗体(Abmicroarray 380)。抗体是经过精心挑选的,这些抗体不仅可以识别人源的蛋白质,对小鼠和大鼠样品同样有效。另外,每个抗体的结合亲和力都经过了实验测定,从多种抗体来源的克隆中筛选出反应特异性好、交叉反应程度小、信号明显的抗体,并且还要保证信号与抗原浓度有着良好的线性关系。优化的抗体
高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来,以其作为抗原或半抗原去免疫小鼠等实验动物,制备特异性抗体,再用这种抗体(第一抗体)作为抗原去免疫动物制备第二抗体,并用某种酶(常用辣根过氧化物酶)或生物素等处理后再与前述抗原成分结合,将抗原放大,由于抗体与抗原结合后形成的免疫复合物是无色的,因此,还必须借助于组织化学方法将抗原抗体反应部位显示出来(常用显色剂DAB显示为棕黄色颗粒)。通过抗原抗体反应及呈色反应,显示细胞或组织中的化学成分,在显微镜下可清晰看见细胞
20(0.025%)液洗也可达到同样的效果。6. 双蒸水1分钟,3次三、免疫显色 1. 滴加3%甲醇双氧水液5-10分钟(室温)。2. TBS/Tween20(0.025%)液1分钟,3次。3. 滴加封闭液5-10分钟(室温)。 4. 擦去多余封闭液,滴加小鼠抗地高辛抗体室温30分钟。5. TBS/Tween20(0.025%)液1分钟,3次。6. 滴加HRP-抗鼠抗体室温30分钟。7. TBS/Tween20(0.025%)液1分钟,3次。8. DAB显色5-30分钟
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