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96T
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文献和实验一、关于3T3-L1细胞模型 3T3-L1是小鼠胚胎来源永生化前脂肪细胞(preadipocyte),形态呈成纤维样;经接触抑制(Contact inhibition)、激素鸡尾酒(MDI,通常包含IBMX、地塞米松和胰岛素)诱导后,启动成脂分化程序,细胞质内大量合成并积累甘油三酯,最终转变为含有明显脂滴的成熟白色脂肪细胞[1]。 3T3-L1是目前脂代谢(Lipid metabolism)和脂肪生成(adipogenesis)研究中最经典、应用最广泛的体外细胞模型。 图1:3T3-L1细胞
【求助】如何提取细胞中的cAMP?和普通蛋白的裂解buffer一样么?
磷酸二酯酶抑制剂。 贴壁细胞可以用一般的蛋白裂解Buffer,有时要加磷酸二酯酶抑制剂。 关于是否需要乙酰化的问题,不同的试剂盒有不同的要求,主要取决于抗体是否灵敏,也取决于最后检测的方法。一般乙酰化之后可以提高10倍的检测灵敏度。如果抗体灵敏,可以免去乙酰化的那一步,太容易引入误差。 另外,如果用荧光法、发光法检测碱性磷酸酶或者辣根过氧化物酶的话,也没必要进行乙酰化,因为荧光法、发光法检测比显色法检测灵敏度高。 另外,Promega公司有基于培养细胞的cAMP检测试剂盒
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] E-AB-F0995Q Elab Fluor® Violet 450 抗小鼠 F4/80 抗体 [CI:A3-1] E-AB-F0994H PE/Cyanine7 抗小鼠 CD86 抗体 [GL-1] E-AB-F1135E APC 抗小鼠 CD206/MMR 抗体 [C068C2] CQM002 CellaQuant™ 小鼠 TNF-α(肿瘤坏死因子α)ELISA 检测试剂盒 E-HSEL-H0001 高灵敏度人 IL-1β(白细胞介素 1β)ELISA 检测试剂盒 E
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