鞘磷脂磷酸二酯酶酸性样蛋白3B(SMPDL3B)等多因子检测

【求助】如何提取细胞中的cAMP？和普通蛋白的裂解buffer一样么？

抑制剂。 贴壁细胞可以用一般的蛋白裂解Buffer，有时要加磷酸二酯酶抑制剂。 关于是否需要乙酰化的问题，不同的试剂盒有不同的要求，主要取决于抗体是否灵敏，也取决于最后检测的方法。一般乙酰化之后可以提高10倍的检测灵敏度。如果抗体灵敏，可以免去乙酰化的那一步，太容易引入误差。 另外，如果用荧光法、发光法检测碱性磷酸酶或者辣根过氧化物酶的话，也没必要进行乙酰化，因为荧光法、发光法检测比显色法检测灵敏度高。 另外，Promega公司有基于培养细胞的cAMP检测试剂盒

【求助】那位大侠用过CAMP测定试剂盒？急需帮忙

酸环化酶和抑制磷酸二酯酶可以增加细胞内cGMP的含量。cGMP特异性磷酸二酯酶的抑制剂被用来治疗人类的某些疾病，比如cGMP特异性磷酸二酯酶类型5的抑制剂（伟哥和***）被用来治疗ED（勃起功能障碍）；腺苷酸环化酶将ATP催化生成cAMP，cAMP可以被磷酸二酯酶水解成ADP。激活腺苷酸环化酶和抑制磷酸二酯酶可以增加细胞内cAMP的含量。腺苷酸环化酶激活受体的阻断剂和cAMP特异性磷酸二酯酶的抑制剂被用来治疗人类的某些疾病，比如针对升高cAMP水平的b-肾上腺素受体的阻断剂被用于治疗心律失常、高血压、心肌

ROS的检测方法

的过氧化氢生成量[15]（15） ； ；自由基的检测方法很多，目前主要有ESR，HPLC，化学发光法以及分光光度法，我看了一点文献，我困惑的是，我要测定细胞中的超氧阴离子和羟自由基，我想用荧光分光光度法或者化学发光法，可是我发现一些反应体系要在酸性条件下反应（比如有的里面就有硫酸）。这对于细胞应该有损伤啊~还有怎样处理细胞~希望对于自由基检测有经验的战友多多指导，也希望希望做自由基检测的新手一起交流.有国外文献提到，DCFH容易自氧化，不稳定，还有正象你文献所说一样，DCFH所反映的是线