含内切核酸酶域蛋白1(ENDOD1)等多因子检测试剂盒(流式

柱上酶切那点事儿

buffer)。 随后以 5-7 ml/min 将酶稀释液注入预装柱中，4℃ 下孵育 12-16h。先洗脱的是酶切后的无标签目标蛋白。 再用含 10mM 还原型谷胱甘肽的 buffer 可以将含 GST 标签的所有组分洗脱。 结语 柱上酶切以其灵活快速的特点简化了我们的实验过程。选择合适的内切酶及构建相应的氨基酸识别序列是成功酶切的关键。 Cytiva 提供一个全流程 GST 标签融合蛋白解决方案，包含 pGEX 系列

ELISA法检测细胞凋亡

  （一） 原理   细胞凋亡的发生，是由于钙- 镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA , 产生180bp ～200bp 或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A 、H2B 、H3 和H4 形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法，应用小鼠抗DNA 和抗组蛋白的单克隆抗体，与核小体片段形成夹心结构，可特异性检测细胞溶解物中的核小体片段。   （二）材料与试剂   1 ．采用Boehringer

蛋白免疫印迹（Western Blot）技术手册

完全或降低样本复杂度只集中于提取目的蛋白（通过采用不同提取方法或选择不同的试剂盒产品） （2）保持蛋白的处于溶解状态（通过裂解液的PH 盐浓度 表面活性剂、还原剂等的选择） （3）提取过程防止蛋白降解、聚集、沉淀、修饰等，（低温操作，加入合适的蛋白酶和磷酸酶抑制剂） （4）尽量去除核酸，多糖，脂类等干扰分子（通过加入核酸酶或采取不同提取策略） （5）样品分装，长期于-80 ℃中保存，避免反复冻融。 4.1细胞裂解 我们公司