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文献和实验一、阿尔兹海默病 阿尔茨海默病(AD)是一种神经退行性疾病,影响着全世界数百万人,且几乎没有有效的治疗方法。其特征包括进行性认知能力下降,包括记忆障碍、定向障碍、语言障碍和行为异常,这不可逆地降低了患者的独立日常生活能力。AD 的发展可分为三个阶段:临床前 AD,轻度认知障碍和痴呆。其主要病理特征包括淀粉样蛋白 β(Aβ)斑点在大脑皮层和海马体中的沉积、tau 蛋白过度磷酸化所形成的神经元纤维缠结(NFT)和神经炎症。这些神经病理学变化可能在 AD 症状出现前几年就有所展现,因此,以上特征
目前诊断阿尔茨海默病(AD)主要依靠临床判断,尚无确切的试验室诊断方法。2006年12月12日美国研究人员于AnnNeurol报告,他们确定了多种有助于早期识别AD的脑脊液蛋白医`学教育网搜集整理。研究者检测了34例AD及34例非AD患者的2000种脑脊液蛋白,从中鉴定出23种蛋白可用于区别AD与非AD,经实测其总敏感性为93%,特异性为90%.研究者称这是向准确诊断AD迈出的重要一步。
1. 杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存。2. 单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。
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