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文献和实验结合。为防止蛋白质与胶体金的聚合与沉淀,常用牛血清白蛋白,卵白蛋白,聚乙二醇或明胶作稳定剂。用Sephacryb S—400 (丙烯葡聚糖S—400 )层析分离纯化胶体金蛋白标记物只适用于以BSA作稳定剂者。一、待标记蛋白质的准备(1)透析除盐:蛋白质溶液内应除去多余的电解质,不然过高的盐类物质会降低胶体金颗粒的Zeta电位,影响蛋白质的吸附,因此,标记之前必须彻底除盐。一般将蛋白质置入透析袋中然后直接放入双蒸水或极低浓度的盐水(0.005mol/L NaCl , pH7.0)透析。(2)去除蛋白质中的
),是与亲合素结合的主要部位;生物素的Ⅱ环结构为噻吩环,带有一个戊酸侧链,末端羧基是标记抗体和酶的唯一结构。抗体分子经生物素化后,其结合抗原的活性不受影响。多种酶结生物素化后,其催化力保持不变或稍有降低。因此生物素可与多种标记物结合,适用于多种免疫检测技术。亲合素主要包括卵白亲合素、链亲合素、卵黄亲合素及类亲合素等。后两种因其特异性亲合力低,研究不多,前两种目前已深入研究并得到广泛应用。1、亲和素(Avidin;A) 亲合素又称卵白蛋白或抗生物素,分子量为68000,pI 10~10.5;在pH 9~13
和抗炎效应的免疫抑制剂。已证实它对眼色素层炎、早期Ⅰ型 糖尿病 、肾病综合症、牛皮癣等有较好的疗效,对特发性血小板减少性紫癜、系统性 红斑狼疮 、多发性肌炎、Crohn病、原发性胆汁性肝硬化、重症肌无力症、类风湿性能关节炎均有一定的治疗效果。FK-506是继环孢素A后发现的另一种真菌代谢物,其结构与环孢素A不同,但它的作用与环孢素A极为相似。FK-506应用剂量较低,故其副作用较小。其它的抗有丝分裂的非特异性免疫抑制剂如硫唑嘌呤、环磷酰胺、环磷酰胺、氨甲喋呤常
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