天冬酰胺合成酶(ASNS)重组蛋白

Western Blot，如何成功优化？

酶、糜蛋白酶的高活性。不抑制凝血酶或因子XPepstatin 胃蛋白酶抑制剂抑制天冬氨酸（酸）蛋白酶如胃蛋白酶、肾素、组织蛋白酶D、凝乳 酶、许多微生物酸性蛋白酶EDTA-Na2金属蛋白酶抑制剂NaF氟化钠丝氨酸、苏氨酸磷酸酶Na3VO4原矾酸钠酪氨酸磷酸酶电泳凝胶的制备蛋白分子量 (kDa)凝胶浓度 (%)4-402012-451510-7012.515-1001025-2008内参对照内参名称分子量大小适用范围Beta-actin43kDa胞浆和全细胞GAPDH30-40kDa胞浆和全细胞

请帮忙回答我的问题，诚谢！

--------------------------- yxiangmind 硫氧还蛋白是低分子量（MW＝11700）的氧化还原酶，在蛋白质折叠过程中可催化二硫键的正确形成。对大肠杆菌表达的重组蛋白正确折叠尤其有效。它做为一种有效的氧化还原剂用于蛋白质折叠中。l理论上利用硫氧还蛋白还原酶缺陷菌株作为宿主菌可以增加表达量。不过，我自己没有做过，呵呵~~，只是理论分析而已！ 转型氨基酸残基 我的理解是这样：肽链关键氨基酸残基，可能影响蛋白的空间折叠构象。例如很多蛋白肽链转角处的蛋白。 我以前做分泌蛋白表达的时候，没有太多的考虑氨基酸亲水数值的影响。不过，理论上讲

[转贴]包涵体纯化复性

经过变性、复性才能获得天然结构以及生物活性，因此应该选择一个合适的复性过程来实现蛋白质的正确折叠，获得生物活性，近年来的研究可以使复杂的疏水蛋白、多结构域蛋白、寡聚蛋白、含二硫键蛋白在体外成功复性。 包涵体形成的原因 重组蛋白在宿主系统中高水平表达时，无论是原核表达体系或真核表达体系甚至高等真核表达体系，都会形成包涵体[2]。主要因为在重组蛋白的表达过程中，缺乏某些蛋白质折叠过程中需要的酶和辅助因子，或环境不适，无法形成正确的次级键等原因形成的[3]。 1、 表达量过高，研究发