Human IL-8 ELISA KIT 人白细胞介素8

IL-8简介：

IL-8是由巨噬细胞产生的单核因子，是趋化因子家族C-X-C亚族（α亚族）中的一员，对中性粒细胞、T淋巴细胞、嗜碱性粒细胞具有趋化作用，能够吸附中性粒细胞，嗜碱性粒细胞和T细胞，但是单核细胞除外。人的IL-8 cDNA 序列表明有99个氨基酸残基。经过剪节掉22个个残基后，形成成熟的具有77个氨基酸的蛋白。IL-8还能够调节T淋巴细胞、B淋巴细胞成熟分化，在炎症反应、免疫调节中起重要作用，并且研究表明IL-8还具有促进血管生成的作用。IL-8在人体内存在两种主要形式，一种是来源于单核细胞含72个氨基酸的多肽，另一种是来源于内皮细胞含77个氨基酸的多肽。72aa比77aa的IL-8具有更高的趋化活性，而77aa的IL-8具有诱导白血病细胞凋亡的功能，其位于N端的五肽序列已被确定是IL-8具有诱导凋亡功能的活性部位。

人IL-8定量分析酶联免疫检测试剂盒组成:

操作步骤:

1.通过计算并确定一次性实验所需的板条数，取出所需板条放置在框架内，暂时用不到板条请放回铝箔袋密封，保存于4℃。

2.建议设置本底较正孔，即空白孔,设置方法为该孔只加TMB显色液和中止液。每次实验均需做标准品对照并画出标准曲线。

3. 分别将样品或不同浓度标准品按照100μl/孔加入相应孔中，用封板膜封住反应孔，室温（25-28℃）孵育120分钟。对于血清血浆样本，先加50ul的样本分析缓冲液，再加50uL样本。如检测超出范围，请先加50ul的样本分析缓冲液，再加用标准品稀释液稀释后的样本50μl检测。请注意记录好样品的稀释倍数，此处加样量50ul相当于已稀释了2倍。

4.洗板5次，且最后一次置厚吸水纸上拍干。

5.加入生物素化抗体工作液(100ul/孔)。用封板胶纸封住反应孔，室温（25～28℃）孵育60分钟。   

6.洗板5次，且最后一次置厚吸水纸上拍干。

7.加入亲和素连接的HRP酶工作液(100ul/孔)。用封板胶纸封住反应孔，避光室温（25～28℃）孵育20分钟。

8.洗板5次，且最后一次置厚吸水纸上拍干。

9.加入显色剂TMB100ul/孔，避光室温（25～28℃）孵育20分钟。

10.加入终止液50ul/孔,混匀后即刻测量OD450值。

 

结果判断:

1.复孔的值在20%的差异范围内结果才有效，复孔的值平均后可作为测量值。

2.每个标准品或标本的OD值应减去本底校正孔的OD值。

3.手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标，以平滑线连接各标准品的坐标点。通过标本的OD值可在标准曲线上查出其浓度。

4.若标本OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。

产品信息

人IL-8定量分析酶联免疫检测试剂盒  48T

人IL-8定量分析酶联免疫检测试剂盒  96T

灵敏度，特异性和重复性:

1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为31pg/ml。

2.特异性：与人GRO、IP-10、MIP-1、MCP-1、MCP-2、MCP-3、I-309，小鼠 KC等没有交叉反应。

3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.

参考文献:

Cornaby et al. 1988, Transpl. proc. 20 (Suppl. 1), 108

Froher et al., 1988, New Eng. J. Med. 318, 1206.

Swain et al., 1991, Current Opinion Immunol. 3, 304.

Smith., 1993, Blood, 81, 1414.

Tigges et al. ,1989, Science, 243, 781