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PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶

PCR 酶数量如此之多，选择正确的酶可能是一项挑战。用于扩增 DNA 的各种酶的保真性、扩增速度和特异性各不相同。以下三个问题可以帮助您解答选择 PCR 酶时需要重点关注的因素。 Q 1：您需要确保序列准确性吗？ 有时您只需要检测 PCR 产物或估算其大小，例如在对小鼠进行基因分型或筛选重组克隆时。对于这种类型的常规 PCR 分析，您应该使用标准的热稳定 DNA 聚合酶（如 Taq DNA 聚合酶）来确认目的 DNA 存在与否。 但是，如果要执行克隆实验或下一代测序（NGS），那么准确性至关

革新​技术！谢晓亮院士 PNAS 重磅推出迄今为止最精准的单细胞 SNV 检测方法

除了所有假阳性，达到了迄今为止最高的精度。图片来源：PNAS研究内容META-CS 的原理及主要操作步骤 META-CS 是基于该团队之前开发的全基因组扩增方法 —— Multiplexed end-tagging amplification (META)，虽然 META 这种基因组线性扩增的方法在检测拷贝数目变异和单核苷酸变异上的准确度都优于以前的 MALBAC，DOP-PCR 等方法，但仍有改善空间。 考虑到一个真正的 SNV 必须在 DNA 两条链的相同位置，而聚合酶错误和 DNA 损伤都只发生

盘点 PCR 的七大应用领域

序 （NGS）中，PCR 被广泛用于构建 DNA 测序文库。在 NGS 文库制备中，DNA 样品通过 PCR 反应富集（在起始量有限的情况下）并使用 adaptor（以及用于多重检测的index）标记（图 9）。除了具有高保真度，DNA 聚合酶还应具有最小的扩增偏好性，从而使测序文库具有高覆盖度。 图 9.使用 PCR 为新一代测序制备 DNA 样品。 7.医学、法医学和应用科学 PCR 技术不仅可用于基础研究，还适用于日常的临床诊断、法医学调查和农业生物技术研究。这些应用要求可靠的性能、卓越的灵敏