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IF TUNEL双染检测
服务介绍:
晚期凋亡细胞中染色体DNA双链或单链断裂产生粘性3'-OH末端,在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的催化下,将带有荧光素分子的dUTP标记到DNA的3'-末端,然后通过荧光显微镜观察、或进而用带有HRP的一抗染色后DAB显色,可以进行凋亡细胞的检测,该实验称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。
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名称 |
规格 |
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IF TUNEL双染检测 |
张 |
实验流程:
脱蜡至水--破膜通透--孵育tunel反应液--微波修复--加一抗4℃孵育过夜--加二抗--DAPI染核——抗荧光淬灭封片--镜检拍照
送样运输要求:
石蜡切片常温、冰冻切片-20℃、固定后细胞爬片4℃
送样须知:
1.南京和上海地区的客户可提供上门取样服务,提前一天联系
2.外地客户可邮寄样本,样本运输应符合一般的生物学要求,密封加冰袋或者干冰运输
3.若细胞、血清、组织样本具有潜在的传染性或致病性,请务必提前告知
4.测试结束提供实验报告后,样本可以保留1个月,若需保留样本或者回收样本请提前告知。
备注:本公司对客户的项目的专有技术和资料(包括实验方案,测试结果,样本等)负有绝对保密的责任。
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文献和实验IF TUNEL双染检测
一、TUNEL法的实验原理 细胞发生凋亡时, 染色体DNA双链或单链断裂产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖
roy2929 小弟新手 实验等等都不怎么懂,希望高手们帮忙。 做TUNEL检测凋亡,除了本身没有发生凋亡和实验操作原因,还有什么可能会没有信号?比如通过其他不能用TUNEL检测到的方式发生了凋亡? 不胜感激 qwer_214 TUNEL是一种很特异的检测凋亡的方式,它主要检测DNA特异性的断裂,恕我资历比较浅,我到目前还没有发现其他用TUNEL检测到的方式发生了凋亡。 roy2929
用了许多方法检测小鼠的肝脏、脑部、睾丸等组织的细胞凋亡,其中 TUNEL 法做的最多,我购买的试剂盒主要是 roche、 promega 公司,结果大多数成功,偶尔也有失败,下面我把实验中的关键问题与大家共享一下,同时也希望能对初学者有所帮忙。 TUNEL 法的实验原理 基本原理:对不同组织切片先增加细胞膜通透性,然后让 rTDT 和生物标记的 dTUTP 进入细胞内,在 rTDT 的辅助下 dTUTP 与核断裂的 DNA 3』-OH 结合,再用 HRP 标记的链霉
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