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- 文献和实验
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- 保质期:
见产品包装
- 库存:
990
- 供应商:
亦高生物
- CAS号:
3483-12-3
- 规格:
D9163-1G/D9163-5G/D9163-25G
| 规格: | D9163-1G | 产品价格: | ¥485.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | D9163-5G | 产品价格: | ¥542.0 |
| 规格: | D9163-25G | 产品价格: | ¥1629.0 |
Jue's optimal reagent for maintaining the - SH group in a reduced state; Quantitative reduction of disulfide
Before SDS-PAGE, DTT can effectively reduce protein disulfide bonds in the sample buffer
DTT can also be used to reduce the disulfide bond bridge of crosslinker N, N '- bis (acryloyl) cystamine to decompose polypropylene xian amine gel matrix
The irritation and toxicity of DTT are lower than 2-mercaptoyi alcohol
Generally, the concentration required for the use of DTT (100mM) is one seventh of the concentration of 2-mercaptoyi alcohol (5% v/v, 700mM)
分析说明
针对用于还原 SDS-PAGE 进行了测试
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文献和实验巯(SH)基 SH-group,sulfhydryl group
生理上重要的物质如辅酶 A、泛酰巯基乙胺、二氢硫辛酸( dihydrolipoic acid)、还原型的谷胱甘肽、半胱氨酸等均有 SH基,在酶或激素中 SH基为不可缺的组成部分。此基团极富反应性,用特异的试剂( SH试剂)或显色反应很容易检验出来。含于蛋白质中的 SH基,由于其存在状态而反应性不同,亦有蛋白质变性后才检验出 SH基。以 SH基为必需基团的酶称为 SH酶。用 SH试剂封阻 SH基能使酶失活,但是能为还原型的谷胱甘肽、半胱氨酸、二硫苏糖醇等再活化或保持稳定。 SH基容易
试剂与设备 1. 表达待检测蛋白质的细菌 2. 50mmol/L Tris-Cl (pH7.4) 3. 2×SDS凝胶加样缓冲液 100mmol/L Tris-Cl (pH 6.8)200mmol/L 二硫苏糖醇(DTT)4% SDS(电泳级)0.2% 溴酚蓝20% 甘油不含有二硫苏糖醇(DTT)的2×SDS凝胶加样缓冲液可保存于室温,临用前须从1mol/L二硫苏糖醇储存液现用现加于上述缓冲液中。
连接酶 0.1Weiss单位 5mmol/L ATP 1μl 于16℃温育1-4小时 10xT4噬菌体DNA连接酶缓冲液 200mmol/L同Tris.Cl(pH7.6) 50mmol/K MgCl2 50mmol/L二硫苏糖醇 500μg/ml牛血清白蛋白(组分V.Sigma产品)(可用可不用) 该缓训液应分装成小份,贮存于-20℃。 另外,再设立两个对照反应,其中含有(1)只有质粒载体;(2)只有外源DNA片段。如果外源DNA量不足,每个
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