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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 供应商:
澳睿赛生物技术(上海)有限公司
- 肿瘤类型:
详见说明书或咨询客服
- 细胞类型:
详见说明书或咨询客服
- 品系:
原代细胞
- 组织来源:
外周血
- 相关疾病:
详见说明书或咨询客服
- 物种来源:
小鼠
- 免疫类型:
详见说明书或咨询客服
- 细胞形态:
圆形,树突状
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书或咨询客服
- 器官来源:
详见说明书或咨询客服
- 运输方式:
常温
- 年限:
不限
- 生长状态:
详见说明书或咨询客服
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
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一、细胞基本属性
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细胞名称
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小鼠外周血树突状(DC)细胞
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组织来源
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外周血
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商品货号
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ORCM256
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种属来源
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小鼠
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产品规格
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5×105cells/T25细胞培养瓶
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细胞简介
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小鼠外周血DC细胞分离自外周血,由外周血单核细胞诱导而成的;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中首次提出外周血这一新概念。树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞,典型的未成熟树突状细胞呈半贴壁生长,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串样集落,细胞大而形态不规则,表面皱褶多,亦可见少量短刺状突,胞内细胞器丰富并可见吞噬泡,具有较强的迁移能力,伴随有部分未完全诱导成的单核细胞,贴壁形态多样。而成熟的树突状细胞由未成熟DC进一步经TNFα、LPS等诱导而成,多数呈悬浮生长, 细胞呈圆形,细胞体积进一步增大,表面大量粗细不等的树枝样突起(高倍镜或者电镜下可观察到 ),伴随少量贴壁未成熟细胞或者单核细胞。未成熟DC细胞长时间培养也可能导致自发分化成熟。DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志,主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,进而激活T淋巴细胞,诱导免疫应答,处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节;未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力,但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答,不能激活T细胞的第二信号,可导致T细胞无能,从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。未成熟树突状细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低,一般在30%以下。
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包被条件
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培养基
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含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
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换液频率
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每2-3天换液一次
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生长特性
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半贴半悬浮
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细胞形态
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圆形,树突状
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传代特性
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属于高度分化细胞;属于不增殖细胞群
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消化液
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0.25%胰蛋白酶
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培养条件
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气相:空气,95%;CO2,5%
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文献和实验小鼠外周血单细胞悬液制备 采集小鼠外周血样本于抗凝管中。 离心管内加入 100 μL 新鲜血,加入 1 Test 对应流式抗体,混匀,4℃ 避光孵育 30 min。 加入 2 mL 1×红细胞裂解液,混匀,4℃ 裂解 5 min。 300 g 离心 5 min(裂解完立即离心,防止时间过长损伤细胞),弃上清可得到白色的细胞沉淀。 PBS 洗涤一遍。 加入 200 μL 细胞染色缓冲液重悬细胞,用流式细胞仪进行检测和分析。 注意事项: 采血用抗凝管,有肝素和 EDTA 两种,若直接裂解
概述 树突状细胞(DC)的主要功能是吸收抗原,进行加工,并向T淋巴细胞呈递。其它抗原呈递细胞也有此功能,如B淋巴细胞和单核细胞。但是,与其它细胞不同的是,DC细胞具有诱导初发免疫反应的独特功能,例如,可以活化处女T细胞(Naive T cell)。DC细胞存在于外周淋巴组织中,已在血液和非淋巴器官中发现了不同类型的DC细胞,并被认为是淋巴组织中细胞的前体。 由于血液和组织中DC细胞含量少,且缺乏特异的DC标记物,所以DC细胞的研究非常困难。因此,关于DC细胞的了解主要
一、方法 根据1999年lutz的方法,做了一些改进,培养DC很多人用的是高浓度的细胞,高浓度的因子,但是这样产量不高,我每一次分离一只小鼠的骨髓,大约可以得到107个细胞,分成10盘,每盘10 ml培养基,用低浓度的细胞因子,这样可以大大提高产量,每次能培养得到1*107个DC左右,流式细胞术检测:细胞纯度应该大于90%,这个方法还是很好用的。 二、具体步骤 1. C57Bl/6小鼠 2. 处死小鼠,75%酒精浸泡10 min。 3. 解剖取出小鼠
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