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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
26
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 物种来源:
小鼠
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞名称:小鼠外周血树突状细胞(DC细胞)
商品货号:YS-01X7581
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
原代细胞试用的实验类型:
原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:
一、细胞增殖检测:
常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验
公司正在出售的产品:
| 昆虫细胞 | ZRSR2蛋白封闭多肽 |
| 鼠黑色素瘤细胞 | 细胞膜钙ATP酶4封闭多肽 |
| 正常人肝细胞 | 凝血酶(凝血因子II)激活肽1封闭多肽 |
| 大鼠施旺细胞 | G蛋白偶联受体6封闭多肽 |
| 人膜膜间皮细胞 | 嘌呤嘧啶核酸内切酶2封闭多肽 |
| 小鼠肥大细胞 | 过氧化酶活化增生受体γ辅助因子2封闭多肽 |
| 小鼠髓样乳腺癌细胞 | 神经酰胺激酶CERK封闭多肽 |
| 大鼠肝窦内皮细胞 | 重组冠状病毒核衣壳突变蛋白(D3L&S235F)His tag, (英国) |
| L-WRN | G蛋白转录因子α3封闭多肽 |
| 正常人表皮角质形成细胞 | Fascin 2蛋白封闭多肽 |
| 小鼠胰岛素瘤β细胞 | 富含精氨酸/丝氨酸剪接因子14封闭多肽 |
| 人胶质母细胞瘤细胞 | p21激活激酶3封闭多肽 |
| McCoy's 5a完全培养基: | 小鼠外周血树突状细胞(DC细胞)重组小鼠CD62p蛋白 |
| 人晶状体上皮细胞系 | G蛋白信号转导调节因子3封闭多肽 |
| 成人真皮成纤维细胞 | α1B糖蛋白封闭多肽 |
原代细胞培养方法及注意事项:
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤
掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色
偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
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文献和实验小鼠外周血单细胞悬液制备 采集小鼠外周血样本于抗凝管中。 离心管内加入 100 μL 新鲜血,加入 1 Test 对应流式抗体,混匀,4℃ 避光孵育 30 min。 加入 2 mL 1×红细胞裂解液,混匀,4℃ 裂解 5 min。 300 g 离心 5 min(裂解完立即离心,防止时间过长损伤细胞),弃上清可得到白色的细胞沉淀。 PBS 洗涤一遍。 加入 200 μL 细胞染色缓冲液重悬细胞,用流式细胞仪进行检测和分析。 注意事项: 采血用抗凝管,有肝素和 EDTA 两种,若直接裂解
概述 树突状细胞(DC)的主要功能是吸收抗原,进行加工,并向T淋巴细胞呈递。其它抗原呈递细胞也有此功能,如B淋巴细胞和单核细胞。但是,与其它细胞不同的是,DC细胞具有诱导初发免疫反应的独特功能,例如,可以活化处女T细胞(Naive T cell)。DC细胞存在于外周淋巴组织中,已在血液和非淋巴器官中发现了不同类型的DC细胞,并被认为是淋巴组织中细胞的前体。 由于血液和组织中DC细胞含量少,且缺乏特异的DC标记物,所以DC细胞的研究非常困难。因此,关于DC细胞的了解主要
一、方法 根据1999年lutz的方法,做了一些改进,培养DC很多人用的是高浓度的细胞,高浓度的因子,但是这样产量不高,我每一次分离一只小鼠的骨髓,大约可以得到107个细胞,分成10盘,每盘10 ml培养基,用低浓度的细胞因子,这样可以大大提高产量,每次能培养得到1*107个DC左右,流式细胞术检测:细胞纯度应该大于90%,这个方法还是很好用的。 二、具体步骤 1. C57Bl/6小鼠 2. 处死小鼠,75%酒精浸泡10 min。 3. 解剖取出小鼠
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