自身免疫性脑脊髓炎模型

一、目的：

建立实验室动物建模的标准操作规程。

二、适用范围：

本SOP适应于科沿有道实验室动物实验所有工作人员。

三、主体内容：

1.实验动物：

适应性饲养一周的健康C57BL/6雌性小鼠。

2.实验器械及物品准备：（所有物品消毒备用）

1）MOG_35-55；

2）弗氏完全佐剂（complete Freund’s adjuvant，CFA）；

3）百日咳毒素（pertussis toxin，PTX）；

4）卡介苗（Bacille Calmette Guerin，BCG）。

3.MOG35-55乳剂配制：

将MOG_35-55溶解于PBS中，配置成初始浓度为3mg/ml。用两支玻璃注射器分别吸取MOG35-55 PBS与CFA（CFA，含BCG 10mg/mL，100mgBCG加入），按等体积混合，连接三通管，在冰上来回推动至明显感觉难以推动为止，再取一滴混悬液在水中，呈现不扩散，即可注射造模。MOG的最终浓度为1.5mg/ml。所有操作均在冰上进行。也可用乳化器间断乳化3分钟至完全乳化。

4.造模：

每只小鼠脊柱背侧皮下注射200µL MOG_35-55乳剂，在脊柱中线两侧各选2个进针点，将总量分为四份分别注入；注射完MOG_35-55后，每只老鼠腹腔注射 500µL含有500ng PTX的PBS，48小时后以同样剂量再注射一次。

5.评价：

小鼠经MOG免疫后，每日采用盲法由两名观察者按症状评分标准对小鼠进行功能评分，直至MOG免疫后35天。