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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Recombinant Mouse ENTPD5 Protein (His Tag)
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
10 µg/20 µg/50 µg
| 规格: | 10 µg | 产品价格: | ¥2310.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 20 µg | 产品价格: | ¥3870.0 |
| 规格: | 50 µg | 产品价格: | ¥3870.0 |
蛋白名称:Mouse ENTPD5 Protein (His Tag)
蛋白构建:A DNA sequence encoding the mouse ENTPD5 (Q9WUZ9) (Thr19-Ser427) was fused with a polyhistidine tag at the C-terminus.
表达宿主:HEK293 Cells
蛋白纯度:> 90 % as determined by SDS-PAGE
蛋白活性:Measured by its ability to hydrolyze the 5’phosphate groups from the substrate guanosine 5’diphosphate (GDP). The specific activity is > 7000 pmols/min/μg.
蛋白内毒素:< 1.0 EU per μg of the protein as determined by the LAL method
预测N端:Thr 19
蛋白分子量:The recombinant mouse ENTPD5 consists of 419 amino acids and has a calculated molecular mass of 46.6 kDa. The recombinant protein migrates as an approximately 45 kDa band in SDS-PAGE under reducing conditions.
蛋白NP号:Q9WUZ9
蛋白氨基酸序列:Thr19-Ser427
蛋白标签:C-His
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文献和实验QIAgene Expression Kit——再也不为重组蛋白的表达效率发愁 据Protein Database的最新数据表明,目前已知的人类蛋白有35,000种(包括splice variants),大约33%的蛋白正处于研究中,但是只有8%的蛋白能够成功表达。统计数据同时显示,目前克隆,表达,纯化的成功率只维持在54%,74%,59%。所以说,在蛋白表达的漫漫征途中,拿不到想要的蛋白是一件非常普遍的事情。举一个例子来说对于目标蛋白不表达或表达量低这个常见问题,需要排除或检查的因素就太多
重组蛋白质的表达、纯化、复性和定量 按Qiagen公司的操作手册进行,具体步骤如下。 一、重组蛋白质的诱导表达 1.挑取转化有质粒的单菌落,接种于3ml 选择性LB液体培养基中,37 o C,250 rpm/min振摇培养过夜。 2.次日将培养过夜的菌液500 μl再接种于10 ml(1: 20)选择性LB液体培养基中,37 o C,250 rpm/min振摇培养至光密度(OD600 =0.6)时,取1 ml样本作为诱导前标本
的温度。在18°C,选择优化的蛋白质表达条件,这可能会增加表达蛋白质的溶解度。故障排除尝试较低的生长温度和较低的诱导剂浓度可以避免包涵体的形成,并有助于一些不正确的二硫键形成和疏水蛋白的情况。为了保护蛋白质,我们可以在培养后向培养基中加入蛋白酶抑制剂,并在冰上破碎细胞以避免降解。在大肠杆菌裂解物中在天然条件下的蛋白质纯化Trx•Tag™是移植到重组蛋白上的肽序列,可以通过肠激酶去除。这种蛋白质标签是一种增稠标签,可以帮助蛋白质正确折叠并防止它们沉淀。由重组pET-32α(+)载体表达的融合蛋白也含有
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