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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
保存在2-8℃，1年。
- 保质期：
保存在2-8℃，1年。
- 英文名：
Total Protein Extraction Kit(suitable For Protein Interaction(Pull-down，co-IP，etc.))
- 库存：
999
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- 规格：
50T/100T
| 规格： | 50T | 产品价格： | ¥1020.00 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100T | 产品价格： | ¥1700.00 |
适用样本
动物细胞/组织
产品介绍
总蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代培养动物 细胞和各种动物实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心 脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织样品中提取总蛋白。配合其他试剂时，也可以用于植 物、细菌、真菌、酵母等样品的总蛋白提取。
本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞膜组份，包括细胞质膜、核膜和各种细胞器 膜。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋 白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白可用于 Pull-down、IP 等蛋白相互作用研究，也可以用于 WB、蛋白 质电泳、ELISA、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白，下游应用范围广，提取液裂解细胞 的能力较温和，需要根据实际样本情况优化裂解时间。
本试剂盒中不含有 EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒按每个处理样本 50 mg 细胞/组织计（大约 50 μl 细胞沉淀体积），如果需要处理 大量的细胞/组织，将提取液按细胞体积的 1：10 加入细胞沉淀即可。每个 50T 试剂盒大约 可以提取 2.5 g 细胞/组织样本的总蛋白。根据不同的细胞类型，100 mg 细胞沉淀物（107 个 细胞）的总蛋白质产量大约为 6mg 左右。
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文献和实验最后，配合双分子荧光互作（BiFC）和遗传学突变表型分析，研究者彻底证实了UBR7是调控N蛋白介导免疫反应的关键负调控因子。 图3 UBR7在N基因介导的对烟草花叶病毒抗性中的功能作用模式 这篇工作给我们的启发是实打实的：TurboID 是开路的，把黑暗中看不见的瞬时互作照出来；Pull-down 和 Co-IP 是压阵的，一锤一锤把论证砸实。两种武器交替用，审稿人才无话可说。 结语 蛋白互作是机制研究和靶点
了一线技术支持常被问到的问题，希望这篇纯干货能帮助大家顺利升级打怪，早日驾驭 IP、co-IP。 IP、co-IP、pull-down 简介 IP（Immunoprecipitation），免疫沉淀：是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等基质上的特异性抗体对抗原进行小型亲和纯化的一种方法 Co-IP（co-Immunoprecipitation），免疫共沉淀： co-IP 是一种常用的鉴定蛋白-蛋白相互作用的方法，其基本实验流程和IP类似，通过使用诱饵蛋白（IP 中的抗原，bait protein）特异
为什么验证蛋白互作，既要做 Co-IP 又要做 GST Pull-down？
反之，Pull-down 阴性也不能否定细胞内互作，阴性结果可能源于体外条件不匹配，而非两蛋白不能结合。 四、证据链的构建：联用而非替代 两个实验的边界恰好互补：Co-IP 覆盖"细胞内是否处于同一复合物"，Pull-down 覆盖"体外是否直接结合"。完整的互作证据链需要两者联合——Co-IP 证明细胞内真实存在复合物，Pull-down 证明该关联可以是直接的。 在具体设计上，可按证据强度分层推进： 待回答问题 适用实验 证据定位 两蛋白是否
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