- ￥339
- 碧云天（beyotime）
- D0378
- 国产
- 2026年01月30日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 保质期：
两年
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件：
-80 ℃
- 规格：
200μl
产品简介：
碧云天生产的Stbl3甘油菌，是收集生长在对数期的Stbl3菌，加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。可以直接划平板或小量、大量培养。特别适合作为慢病毒(lentivirus)载体和其它逆转录病毒载体等含有重复序列的载体或其它较大并且不太稳定的载体的宿主菌以进行质粒的转化、克隆和扩增。
大肠杆菌Stbl3菌株来源于HB101 E. coli 菌株，其基因组含有重组酶recA13突变，可以抑制长片段末端重复区的重组，所以能有效转化、克隆和扩增含有重复序列的慢病毒载体和其它逆转录病毒载体。
本菌株非常稳定，和常见的大肠杆菌菌株相比，对于慢病毒载体等较大质粒或其它不稳定载体的转化效率以及克隆和扩增的稳定性有显著提高。
Stbl3菌株的基因型：F- mcrB mrr hsdS20 (rB-, mB-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2rpsL20(StrR) xyl-5
λ- leu mtl-1 endA1+。
本菌株具有链霉素抗性，并且不能用于质粒的蓝白斑筛选。
本菌株可以使用常规的LB培养基或SOC培养基进行培养。
保存条件：
-20℃保存，至少3个月有效。-80℃可以长期保存。
注意事项：
使用本甘油菌时可以不必完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。在没有结冻的情况下，菌体会逐渐沉淀至管底，请务必注意适当混匀后使用。
为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板然后再挑取单克隆菌落进行后续操作。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验系列）：高拷贝会导致大片段质粒复制压力大，易丢失或断裂，优先用低拷贝载体（如 pACYC184，拷贝数 10-15）或大片段专用载体（如 BAC 载体 pBeloBAC11，可容纳 100kb 以上片段，在大肠杆菌中稳定存在）； ④选择合适的连接方法，比如 Gibson 组装（无缝克隆）的方法更适合 10-20kb 大片段的连接，相比传统的 T4 连接的方法，成功率更高，操作更简便； ⑤选择重组缺陷型感受态，提高大质粒的转化效率，如 Stbl3、DH10B 等，此外转化方式也会影响转化
Inducible shRNA Lentiviral Vectors
Stbl3™ Competent E. coli Note: You may store the LR reaction at -20° C for up to 1 week before transformation, if desired. 2. Transforming One Shot® Stbl3™ Competent E. coli 1) Thaw, on ice, one vial of One Shot® Stbl3™ chemically
短片段（5kb 以内）的序列克隆成功率。对于提高大片段克隆的成功率，可以从以下几方面考虑： ①选择合适的克隆载体，例如 pCC1-Brick 等适合装载大片段的载体； ②选择合适的克隆方法，通常无缝克隆技术如 Gibson 组装或者 Golden Gate 克隆对于大片段的组装效率更高； ③选择合适的纯化方式，纯化目的基因片段和线性化载体片段后再使用，并且注意两者的使用比例； ④选择合适的大肠杆菌感受态细胞，例如 stbl3，JM109 等； ⑤挑选单克隆菌落时需要注意，成功重组大片段的阳性单克
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