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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
AAV病毒包装(干扰三保一)
- 保质期:
1年
- 供应商:
瓦兰生物
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
1
AAV病毒包装(干扰三保一)
总量≥2x10vg
赠送:等量NC阴性对照
备注:不同血清型可选,各种组织特性性启动子可选(三靶点包装,不含shRNA有效性验证)
慢病毒感染快速指南
1. 将目的细胞按 30%汇合度接种到 24 孔板,约 3-5×104细胞数/孔,不同细胞因为细胞大小不同细胞数量会不同,快速指南以细胞数量为 5×104为例,加入 500uL 完全培养基进行细胞培养。
2. 接种后 12-20h 感染阴性对照慢病毒(接种细胞至病毒感染细胞时间不宜太长,否则细胞增殖影响细胞密度不利用后期抗性筛选)。
3.加病毒量计算方法:(细胞数×MOI 值/病毒滴度)×103=病毒量(uL),加病毒量见下表。同时加入 Polybrene,每孔加 0.25uL,浓度为 10mg/mL Polybrene,细胞培养液中终浓度为5ug/mL。
4.感染 16-20h 后更换培养基,弃去培养基,每孔加入 500uL 新鲜的培养基。
5.感染后 48-96h 显微镜观察荧光。(注:如果 48h-96h 期间细胞汇合度达到 100%,请及时传代培养)
6.建议将 48 孔板细胞进行传代,传代 12 孔板,后继续观察荧光,根据细胞状态和荧光细胞比例综合判断细胞感染最佳 MOI 值。一般选择细胞生长良好,感染效率 80%左右的感染条件作为最佳感染条件。(注:100%荧光感染不一定为细胞最佳 MOI 值,因为可能会造成细胞慢病毒感染拷贝数太高,影响细胞状态)
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文献和实验遗传性眼病是一类由于基因缺陷而导致的疾病,目前已报道大约有 200 种遗传性眼病和超过 400 种具有眼部表现的系统性疾 病。遗传性眼病引起的视觉功能丧失通常很难通过传统的手术、激光治疗和局部药物治疗来治愈。基因治疗已成为治疗这类疾 病最重要的手段。腺相关病毒(AAV)由于具有安全性好、免疫原性低、表达时间长、有多种组织和细胞特异性血清型可选 择、高稳定性等优势,已被广泛应用于眼科疾病基因治疗。首款获批上市的遗传性视网膜疾病基因治疗药物 Luxturna(约 85 万 美元/剂)采用了 AAV
腺相关病毒(AAV)作为一种安全、持久、高效、高特异性的基因操作工具,在生物学特别是神经生物学领域中被广泛使用。许多新手对于 AAV 的使用往往是知其然而不知其所以然。这篇短文将以图文结合的形式争取让大家在最短的时间内全面了解这种病毒工具。 什么是 AAV? 野生型 AAV 是一种复制缺陷型微小病毒,需要腺病毒或疱疹病毒帮助其在体内复制扩增。而我们做实验用的是不需要辅助病毒的重组 AAV 病毒(rAAV)。将目的基因的 CDS 区序列或者 RNAi 干扰序列插入 rAAV 表达质粒中,包装
过抑制小鼠 SERPINB10 基因表达。发现屋 尘螨 HDM 诱导的气道炎症和 Th2 反应有所 缓解,HDM 诱导的 Th2 细胞因子分泌和 HDM 特异性 IgE 水平显著降低,且诱导了 Th2 的凋亡增加。 血清型:AAV6 注射方式:气管内注射 病毒滴度:6.32x1012 vp/ml 30 μl 靶向部位:肺 动物模型:6-8 周龄 C57BL/6J 雌性小鼠 2019 年 2 月,上海交通大学医学院附属上 海总医院重症医学科在 Cell Death and Disease 上发是表
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