Mouse Gapdh qPCR Primer Pair

Mouse Gapdh qPCR Primer Pair，即小鼠Gapdh qPCR引物对，主要用于基于SYBR Green的qPCR、One-Step qRT-PCR或semi-quantitative PCR。本引物为预先设计、经过qPCR验证、预混的引物对。

qPCR (Quantitative PCR)即定量PCR，也称实时荧光定量PCR或实时定量PCR (Real-time quantitative PCR)、实时PCR (Real-time PCR)，是一种在DNA扩增反应过程中，以荧光定量测定每个聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。qPCR常用的两种方法是SYBR Green等荧光染料法和探针法。SYBR Green等荧光染料法是使用带有荧光的、非特异的DNA结合染料SYBR Green等以检测PCR过程中积累的PCR扩增产物；而探针法(Probe method)，也常被称为TaqMan探针法，不使用荧光染料，而采用荧光基团和淬灭基团(Quencher)标记的DNA探针靶向拟通过PCR检测的目标序列[1,2]。

对于SYBR Green等染料法，引物至关重要。本系列引物产品采用碧云天开发的引物设计算法，优化了序列并经过验证，特异性佳，扩增效率高，引物二聚体形成发生率低，qPCR数据可靠；本系列引物对一般都跨外显子(Span exon junctions)，避免了对基因组DNA (gDNA)的扩增[3,4]；本系列的引物产品非常丰富，几乎包含了所有人和小鼠的基因；引物的Tm值约60ºC，大多数扩增产物(Amplicon)的长度约90-160bp。同时碧云天还提供针对各个信号通路的引物组合(Primer Panel/Primer Array)。

本产品为预混冻干粉，每管含正向引物(Forward primer，也称上游引物)和反向引物(Reverse primer，也称下游引物)各1nmol，共2nmol，不含核酸酶(Nuclease-free)，只需加入400μl超纯水溶解成2.5μM each，即可使用。按20μl或25μl体系使用2μl引物，本产品每管可以用于200次qPCR实验。

Gene Information
Gene Name	glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase
Gene Symbol	Gapdh
Synonyms	Gapd
Organism	Mouse
Gene ID	14433
UniProt ID	P16858
Main Accession No.	NM_008084
Other Accession No.	BC083065, BC083079, BC083080, BC083149, BC085274, BC085275, BC085315, BC091768, BC092252, BC092264, BC092267, BC092294, BC093508, BC094037, BC095932, BC096042, BC096440, BC096590, BC110311, NM_001289726, NM_008084, NM_008084.1, NM_008084.2, NM_008084.3, NM_001289726.1, BC091768.1, BC096042.1, BC020407, BC023196, BC091736, BC145810, BC145812, BI851476, BU504528
Map Location	6 F2; 6 59.32 cM
Pathway	Housekeeping gene, used for internal control
Gene Summary	This gene encodes a member of the glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase protein family. The encoded protein has been identified as a moonlighting protein based on its ability to perform mechanistically distinct functions. The encoded protein was originally identified as a key glycolytic enzyme that converts D-glyceraldehyde 3-phosphate (G3P) into 3-phospho-D-glyceroyl phosphate. Subsequent studies have assigned a variety of additional functions to the protein including nitrosylation of nuclear proteins, the regulation of mRNA stability, and acting as a transferrin receptor on the cell surface of macrophage. Alternative splicing results in multiple transcript variants. Many pseudogenes similar to this locus are found throughout the mouse genome. [provided by RefSeq, Jan 2014]

 

Amplicon Information
Amplicon Length (bp)	152
NCBI mRNA ID	NM_008084.3
NCBI Protein ID	NP_032110.1
Ensembl Transcript ID	ENSMUST00000118875.8
Ensembl Gene ID	ENSMUSG00000057666.19
Ensembl mRNA ID	Gapdh-203

包装清单：

产品编号	产品名称	包装
QM00014S	Mouse Gapdh qPCR Primer Pair	1nmol each
QM00014M	Mouse Gapdh qPCR Primer Pair	1nmol each ×5
QM00014L	Mouse Gapdh qPCR Primer Pair	1nmol each ×25
—	说明书	1份

保存条件：

-20℃保存。建议复溶后进行适当分装，避免反复冻融。

注意事项：

PCR扩增产物的长度可能会因基因转录后存在多种剪接形式而有所差异。

虽然本系列引物产品的特异性非常好，但仍建议进行熔解曲线(Melt curve)分析以确定扩增反应的特异性。如果只有一个熔解曲线峰(对应的退火温度即双链DNA产物的Tm值)，说明只有一种单一产物；如果熔解曲线出现双峰、多峰或杂峰峰，可能是引物二聚体或非特异性扩增、存在基因组DNA污染、试剂及环境被污染等。建议设置不含模板的对照(No template control, NTC)，即反应体系中包含除模板以外的所有反应组分，根据样品孔和无模板对照孔熔解曲线的差异，可判断是否存在引物二聚体或其它的非特异性扩增。

若反应体系存在扩增产物污染，推荐使用防污染型qPCR Mix。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。