- ￥888 - 1169
- 碧云天（beyotime）
- 国产
- D2608
- 2025年07月09日
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零下20℃
- 保质期：
至少一年有效
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现货
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 规格：
1μg/100μg
| 规格： | 1μg | 产品价格： | ￥888.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100μg | 产品价格： | ￥1169.0 |
产品简介：
pCMV-Cre-EGFP是碧云天自行研发的含有CMV启动子的用于在哺乳动物细胞中表达带有EGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein, 增强绿色荧光蛋白)标签的Cre Recombinase (Cre重组酶)的表达质粒。来自条件性基因敲除(Conditional gene knockout) 小鼠等含有预先插入loxP位点的细胞在转染本质粒后，本质粒表达的Cre Recombinase可以导致两个loxP位点间的基因删除，从而实现条件性基因敲除。
Cre重组酶是来源于大肠杆菌噬菌体P1的一种类型I的拓朴异构酶(Type I topoisomerase)，也是一种酪氨酸重组酶(tyrosine recombinase)，它可识别34bp的loxP位点(两端为两个13bp的反向重复序列(inverted repeats)，中间是8bp的间隔区(图1)并催化loxP位点之间的DNA发生重组；重组产物根据loxP位点的位置和相对方向的不同而不同，两个含单loxP位点的DNA将发生融合：两个正向重复的loxP位点间的DNA将以环状形式被切割，而两个反向loxP位点间的DNA序列将被翻转(图2)。
图1. loxP位点序列图。Cre重组酶与两端13bp反向重复序列(小写字母)结合，中间是8bp不对称中心间隔区(大写字母)，箭头所示为Cre重组酶的酶切位点。
图2. Cre-loxP位点特异性重组示意图。
pCMV-Cre-EGFP质粒转染HeLa细胞后的荧光表达效果，可以看到EGFP标签的Cre重组酶主要分布在细胞核中(图3)。
图3. pCMV-Cre-EGFP质粒转染HeLa细胞后的表达效果图。左图为明场照片，中图为荧光照片，右图为叠加照片。
本质粒为卡那霉素抗性，转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-Cre-EGFP质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Cre recombinase | 677-1705 |
| EGFP | 1718-2437 |
| multiple cloning site | 2349-2497 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 2541-2562 |
| SV40 polyA signal | 2574-2957 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 3095-3399 |
| bla promoter | 3424-3548 |
| SV40 promoter | 3568-3906 |
| neomycin/kanamycin resistance ORF | 3941-4732 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 4733-5191 |
| pUC origin | 5320-5987 |
pCMV-Cre-EGFP质粒(6039bp)的图谱如下：
pCMV-Cre-EGFP的详细图谱见说明书
pCMV-Cre-EGFP中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-Cre-EGFP)包括：
| AflII | AhdI | AscI | BaeI | BbsI | BbvCI | BlpI |
| BmgBI | BsiWI | BspEI | BspQI | BstEII | BstXI | BstZ17I |
| EarI | EcoNI | FseI | NotI | PflMI | PmeI | PmlI |
| PpuMI | PspXI | SacII | SapI | SbfI | ScaI | SgrAI |
| SmaI | SrfI | SwaI | TspMI | XcmI | XmaI |
pCMV-Cre-EGFP中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-Cre-EGFP)包括：
| AccI | GT`MK,AC | 2463 | KasI | G`GCGC,C | 4068 |
| AclI | AA`CG,TT | 1047 | MfeI | C`AATT,G | 2821 |
| AfeI | AGC|GCT | 660 | MluI | A`CGCG,T | 2957 |
| ApaI | G,GGCC`C | 2492 | MscI | TGG|CCA | 4151 |
| ApaLI | G`TGCA,C | 5673 | NarI | GG`CG,CC | 4069 |
| AsiSI | GCG,AT`CGC | 1133 | NdeI | CA`TA,TG | 240 |
| AvaI | C`YCGR,G | 2474 | NheI | G`CTAG,C | 597 |
| BamHI | G`GATC,C | 1032 | NruI | TCG|CGA | 891 |
| BclI | T`GATC,A | 2728 | PaeR7I | C`TCGA,G | 2474 |
| BglII | A`GATC,T | 2468 | PaqCI | CACCTGCNNNN`NNNN, | 1286 |
| BmtI | G,CTAG`C | 597 | PflFI | GACN`N,NGTC | 4187 |
| BsaI | GGTCTCN`NNN,N | 5058 | PluTI | G,GCGC`C | 4068 |
| BsaXI | ,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` | 3118 | PshAI | GACNN|NNGTC | 1512 |
| BsmBI | CGTCTCN`NNNN, | 1360 | PspOMI | G`GGCC,C | 2492 |
| BsoBI | C`YCGR,G | 2474 | PstI | C,TGCA`G | 2444 |
| BsrGI | T`GTAC,A | 2427 | SacI | G,AGCT`C | 651 |
| BssHII | G`CGCG,C | 914 | SalI | G`TCGA,C | 2462 |
| CspCI | ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN` | 382 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 3841 |
| DraIII | CAC,NNN`GTG | 3184 | SfoI | GGC|GCC | 4070 |
| EagI | C`GGCC,G | 3975 | SpeI | A`CTAG,T | 2486 |
| Eco53kI | GAG|CTC | 653 | StuI | AGG|CCT | 3890 |
| EcoRI | G`AATT,C | 2450 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 4187 |
| Esp3I | CGTCTCN`NNNN, | 1360 | XbaI | T`CTAG,A | 2480 |
| HindIII | A`AGCT,T | 2438 | XhoI | C`TCGA,G | 2474 |
| HpaI | GTT|AAC | 2834 | XmnI | GAANN|NNTTC | 885 |
如需对pCMV-Cre-EGFP质粒中插入片段Cre-EGFP进行测序时，推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下：
T3 primer (620-639): 5' AATTAACCCTCACTAAAGGG 3'
T7 primer (2541-2562): 5' GTAATACGACTCACTATAGGGC 3'
pCMV-Cre-EGFP的全序列信息:：D2608 pCMV-Cre-EGFP 全序列.txt
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验静脉注射，病毒注射总量为 1×10^11 vg/小鼠。Luc 的表达由 cTnT 启动子控制。（DOI: 10.1038/gt.2010.105） 图 4. 五种 AAV 血清型在小鼠体内的心脏基因递送效率比较。注射方式为左心室前壁注射，病毒注射总量为 5×10^10 vg/小鼠，体积为 10μL。Luc 的表达由 cTnT 启 动子控制。（DOI:10.1002/jgm.1576） 图 5. 五种 AAV 血清型以不同剂量注射至小鼠体内的心脏基因递送效率比较。注射方式为颈静脉注射。EGFP
lwjssry 求含有CRE重组酶序列的载体，有如下质粒可交换，或积分交换 表达载体： pcDNA3.1(+) pcDNA3.1/GS pcDNA4HisMax B pIRES2-EGFP pAAV-IRES-hrGFP pBudCE4.1 pEGFP-C1 pEGFP-N1 pCMV-DsRed 腺病毒载体 pADeasy-1,pShuttle，包括菌种
类型的神经元也会展现出各种细微的突起特征，以适应多样的神经回路。不同类型的神经元在大脑中形成了复杂的回路。因此，了解详细的神经元形态对于理解正常的神经功能和病理机制至关重要。本文开发了一种策略，在整个大脑中稀疏标记相同类型的神经元，并在自闭症动物模型⸺Shank3 基因敲除（KO）小鼠中测试了其应用。 使用病毒 AAVPHP.eB-hSyn-DIO-EGFP-P2A-EGFPf 注射方式 眼眶后注射 注射计量 病毒滴度1.3E+12 vg/mL，注射体积 100μL 实验
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