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999
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亦高生物
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9001-57-4
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I4504-1G

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文献和实验相关专题 一、目的 了解植物 组织中提取蔗糖酶的方法,掌握蔗糖酶活力测定的原理。 二、原理 本实验以Nelson 方法测定酶活力,其原理是:蔗糖酶可将非还原性的蔗糖水解为葡萄糖和果糖,而葡萄糖作为还原糖含有的自由醛基,在碱性溶液中将Cu 2+ 还原,还原糖本身被氧化成羟酸;砷钼酸试剂与氧化亚铜生成蓝色复合物(砷钼蓝),在510nm 波长下有正比于还原糖浓度的光密度,从而确定蔗糖酶的活力,该法测定的范围为25~200μg。 三、主要
摘要 随着分子生物学的发展,不论对酶分子本身作用机制的研究以及其他研究,越来越需要纯度很高的酶制剂,这就要求我们熟悉酶提纯的一般操作及酶的提纯及活力测定等重要的生物实验技术,本次实验主要是提取啤酒酵母中的蔗糖酶并测定其Km。在试验过程中用乙醇分级沉淀法,DEAE-Cellulose柱层析,分子筛层析提取纯化蔗糖酶。在实验过程中,虽然我们很努力,但由于我们对实验的程序不熟悉,因此在实验的一些过程中有一些明显的操作失误,使得实验的最后测定结果与理论值有一定出入。 关键词 蔗糖酶 透析
. (1971) Reversible denaturation of enzymes by sodiumdodecyl sulfate. J. Biol. Chem. 246, 4504-4509. 2. Ames, G. F. L. and Nikaido, K. (1976) Two-dimensional gel electrophoresis ofmembrane proteins. Biochemistry15, 616-623. 3. Remy, R
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