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北京百泰派克生物科技有限公司
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蛋白质水解
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自然界中发现的蛋白质大小从5kDa到400kDa不等。蛋白质水解过程将蛋白质切成较短片段,即肽段,蛋白质水解是肽质谱鉴定分析之前至关重要的一步,是蛋白质鉴定和表征、生物标记物的发现成功进行的基础。尽管质谱可以研究完整的蛋白质,但是较小的肽更容易进行蛋白质鉴定。且可提高蛋白质的覆盖率,因为蛋白质覆盖率由于溶解性和异质性可能会降低。因此,最常见的蛋白质组学方法往往会利用位点特异性酶切位点来产生较小的多肽片段。质量较小的肽段更容易通过高效液相色谱(HPLC)和HPLC偶联质谱进行分离和表征。

BTP-蛋白质水解服务
百泰派克生物科技提供两种水解蛋白质的方法:
(1)凝胶内水解(聚bǐngxīxiānàn凝胶基质中的蛋白质水解);
(2)溶液内水解(蛋白质在氯仿/甲醇中沉淀,然后在尿素中再溶解后进行)。
通过一维或二维凝胶电泳分离的蛋白质,可直接在凝胶内进行水解,凝胶内水解,有效且可重现好,但比较费力费时。相较于凝胶内水解,溶液内水解方法更省力,所需的时间较少,但溶液内水解的蛋白,蛋白的再溶解度低,可能会导致一定的样品损失。
蛋白质水解的流程
百泰派克生物科技可同时提供凝胶内水解和溶液内水解两种蛋白质水解相关服务。蛋白质水解的工作流程包括: 1. 制备裂解液; 2. 溶液内或凝胶内进行酶切; 3. 使用离液剂(如尿素和胍)使蛋白质变性; 4. 使用DTT还原二硫键; 5. 使用diǎnyǐsuān或diǎnyǐxiān胺将半胱氨酸烷基化; 6. 去除试剂和交换缓冲液; 7. 在适当的pH和温度下,用胰蛋白酶或其他蛋白酶在碳酸氢铵缓冲液中过夜变性约18小时; 8. 加入酸类物质终止酶切。 9. 蛋白质富集/清洗。

样品要求
百泰派克生物科技可处理各种类型的样本,包括但不限于: 天然来源的蛋白质; 重组来源的融合蛋白和标记蛋白; 不同亚型的抗体; 膜蛋白及其他。
蛋白质酶切的优点
• 灵活性:我们提供凝胶内和溶液内水解两种蛋白质水解策略; • 高准确性和覆盖范围:我们的水解服务可以大大提高质谱分析的准确性和覆盖范围。 • 应用广泛:可促进蛋白质的鉴定和表征,发现疾病的生物标志物,并有助于理解生物学过程。
完整的蛋白质组学服务:我们提供完整的蛋白质组学服务,涵盖蛋白质组学分析的整个过程,可对水解后的样品进行分析测定,一站式为您解决组学问题。百泰派克生物科技还提供高通量自动化蛋白质水解服务,欢迎咨询。
其他服务项目

优质检测平台
(1)基于生物化学、分子生物学、色谱的检测分析平台
该平台配备了Agilent 2100 生物分析仪、ProteinSimple凝胶成像系统、高效液相色谱系统,为蛋白质组学、代谢组学分析保驾护航,包括样品制备、分离纯化分子量测量、杂质表征表达研究等:
(2)基于质谱技术的蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白测序平台
该平台配备了超高效液相色谱质谱联用,Orbitrap Fusion Lumos Tribri,Thermo Scientific Exploris以及氢气交换质谱仪配合机械臂为蛋白贡组学、代谢组学和蛋白测序提供了全面的分析手段,包括蛋白质和代谢物的分离、质谱分析、结构分析以及动态信息研究;
(3)生物药物表征平台
该平台配备了DSC-FTRR差示扫描量热仪与傅立叶变换拉曼光谱仪,氢气交换质谱仪配备机械臂,为生物药物表征提供了全面的分析手段,包括生物药物的分离、纯化、结构分析和动态信息研究:
(4)基于10x Genomics的单细胞分析平台
该平台能够完成基于10x Genomics单细胞分析平台的检测流程包括单细胞分选、cDNA合成、文库制备、文库质量检测、PCR扩增以及高通量测序;
(5)基于Fluidigm的单细胞质谱流式检测平台
采用基于Fluidigm Helios流式细胞仪(Mass Cytometry Systemfor Single Cell Analysis)用于单细胞质谱分析,该平台能够完成包括单细胞捕获、cDNA合成、实时定量PCR分析、目标区域扩增以及质谱流式细胞分析;
(6)基于高精度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台
基于高精度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台,能够完成包括多肽分离、纯化、合成、质谱分析、免疫学检测以及分子相互作用研究;
(7)生信云平台
基于生物信息分析方法的生信云平台,能够完成一整套的生物信息学解决方案,包括组学数据的质量分析、差异表达分析、差异表达物GO、KEGG、COG注释分析、聚类分析、相互作用网络等多层次网络和通路的分析。
百泰派克生物科技-生物制品表征,生物质谱多组学优质服务商
北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则,通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证,建立了完备的质量体系,数据冷热/异地备份,设备定期计量/期间核查,软件审计追踪,为客户提供一体化解决方案和技术服务,支持新药研发、药物申报注册和生产放行。
1.公司采用ISO9001质量控制体系,专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务;
2.获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务;
3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等;
4.七大质量控制检测平台,满足您一站式服务需求;
5.服务3000+企业,10000+客户的选择;
6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!
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文献和实验实验四十 大分子物质的水解试验 一、目的要求 证明不同的微生物对复杂有机大分子的水解能力不同,从而说明不同的微生物有不同的酶系统。 二、基本原理 细菌对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用,必须靠产生的胞外酶,如淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶将大分子物质分解。胞外酶能分泌扩散到细胞外,将物质分解成小单位如糖、氨基酸、甘油与脂肪酸。这些小单位的物质能被细菌吸收和利用。水解过程可通过底物的变化
在水溶液中,有些盐类的离子跟水电离出来的H 或OH - 结合,生成弱电解质,使溶液呈现碱性或酸性,这种现象叫做盐的水解。盐类水解的原因是盐的组成中含有弱酸的酸根离子或弱碱的金属离子。当这些离子遇到水里的H 或OH - 结合生成弱酸或弱碱时,会破坏水的电离平衡,使溶液呈现碱性或酸性。强酸强碱盐不发生水解。盐类水解的程度主要取决于盐类本身的性质,它的弱酸或弱碱性越弱,盐类水解程度越大。水解平衡跟电离平衡相似,也随温度和浓度的变化而移动。水解反应是中和反应的逆反
催化水解反应的酶之总称。是酶分类中的一大类。反应式以 A-B H2 O—→ AOH BH表示。根据被分解的键或化合物的种类进行分类。 1.酯键:酯酶: 2.糖苷化合物:糖苷酶,如淀粉酶、核苷酶; 3.醚键:硫醚键与醚键; 4.肽键:包括肽酶、蛋白酶; 5.肽键以外的 C- N键:如酰胺酶; 6.酸酐:如 ATP酶、焦磷酸酶; 7. C- C键; 8.卤化物; 9. P- N键; 10. N- S键; 11. C- P键。(数字为酶编号的第 2位数字)。水解酶一般不含辅酶。反应
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