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- H2AZ1基因敲除质粒
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上海经科化学科技有限公司
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5µg
pLenti-H2AZ1-sgRNA (H2AZ1基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因，或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。
本质粒在细菌中为Amp抗性，全长约13,000bp。本质粒的关键图谱信息请参考图1。本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除，以及通过puromycin筛选稳定细胞株；也可以与pMDLg、Rev及VSV-g共转HEK293T细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装，然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。
图1. 表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的pLenti-sgRNA质粒关键图谱信息。
H2AZ1基因的基本信息如下：
| Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
| Human | H2AZ1 | 3015 | BC018002 | NM_002106 |
| About the gene | |
| Official Symbol | H2AZ1 |
| Previous Symbol | H2AZ |
| Official Full Name | H2A histone family member Z |
| Synonyms | H2A.Z |
| Location | 4q23 |
| Gene Type | protein-coding gene |
| Uniprot ID | P0C0S5 |
| Pathway/Library | Epigenetic Regulators Related Genes Library |
| Gene Summary | Histones are basic nuclear proteins that are responsible for the nucleosome structure of the chromosomal fiber in eukaryotes. Nucleosomes consist of approximately 146 bp of DNA wrapped around a histone octamer composed of pairs of each of the four core histones (H2A, H2B, H3, and H4). The chromatin fiber is further compacted through the interaction of a linker histone, H1, with the DNA between the nucleosomes to form higher order chromatin structures. This gene encodes a replication-independent member of the histone H2A family that is distinct from other members of the family. Studies in mice have shown that this particular histone is required for embryonic development and indicate that lack of functional histone H2A leads to embryonic lethality. |
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文献和实验Hu, R.; Qin, J.; Feng, W.; Song, X.; Huang, H.; Dai, C.; Zhang, B.; Chen, Y. Lysosomal zinc nanomodulation blocks macrophage pyroptosis for counteracting atherosclerosis progression. Sci. Adv. 2025, 11, eadu5303
一．概述：基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术，是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA 同源重组原理，用设计的同源片段替代靶基因片段，从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展，除了同源重组外，新的原理和技术也逐渐被应用，比较成功的有基因的插入突变和iRNA ，它们同样可以达到基因敲除的目的。二．实现基因敲除的多种原理和方法：1．利用基因同源重组进行基因敲除基因敲除是80年代后半期应用DNA 同源重组原理发展起来的。80
以最火热的 p53 为例Step1 先找 p53 基因序列1. NCBI--输入 p53 并选择物种 human：tumor protein p53 [Homo sapiens (human)]https://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene2. Ctrl+F，输入 sequence，快速定位（当然其实拉下去就是了），点击 Genebank3. 下载 p53 基因序列4. 用 SnapGene 软件打开序列，并简单了解每个元件最好是可以学一下 SnapGene 这个软件的使用
敲除的没法搞，因为老鼠几乎不会活，所以从这个角度讲，2楼的兄台还是有一定道理的！ 洄游的鱼 大鼠基因敲除研究才刚刚开始，肯定是没有的。前面几位说的对，TLR全部敲除？有20多种TLR呢，可能还有新的，怎么做啊？ AME Jackson Lab have TLR 2,3, 4 mutation mice. http://jaxmice.jax.org/jaxnotes/archive/498i.html
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