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- 技术资料
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零下20℃
- 保质期:
至少一年有效
- 英文名:
histone cluster 1 H2A family member d
- 库存:
现货
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 规格:
5µg
pLenti-H2AC7-sgRNA (H2AC7基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因,或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。
本质粒在细菌中为Amp抗性,全长约13,000bp。本质粒的关键图谱信息请参考图1。本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除,以及通过puromycin筛选稳定细胞株;也可以与pMDLg、Rev及VSV-g共转HEK293T细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装,然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。

图1. 表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的pLenti-sgRNA质粒关键图谱信息。
H2AC7基因的基本信息如下:
| Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
| Human | H2AC7 | 3013 | BC093807 | NM_021065 |
| About the gene | |
| Official Symbol | H2AC7 |
| Previous Symbol | H2AFG |
| Official Full Name | histone cluster 1 H2A family member d |
| Synonyms | H2A/g; H2A.3 |
| Location | 6p22.2 |
| Gene Type | protein_coding |
| Uniprot ID | P20671 |
| Pathway/Library | Epigenetic Regulators Related Genes Library |
| Gene Summary | Histones are basic nuclear proteins that are responsible for the nucleosome structure of the chromosomal fiber in eukaryotes. This structure consists of approximately 146 bp of DNA wrapped around a nucleosome, an octamer composed of pairs of each of the four core histones (H2A, H2B, H3, and H4). The chromatin fiber is further compacted through the interaction of a linker histone, H1, with the DNA between the nucleosomes to form higher order chromatin structures. This gene is intronless and encodes a replication-dependent histone that is a member of the histone H2A family. Transcripts from this gene lack polyA tails; instead, they contain a palindromic termination element. This gene is found in the large histone gene cluster on chromosome 6p22-p21.3. |
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文献和实验Hu, R.; Qin, J.; Feng, W.; Song, X.; Huang, H.; Dai, C.; Zhang, B.; Chen, Y. Lysosomal zinc nanomodulation blocks macrophage pyroptosis for counteracting atherosclerosis progression. Sci. Adv. 2025, 11, eadu5298
1、质粒的概念 质粒(Plasmid)是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子,能够独立于宿主染色体进行自我复制,并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因(如抗生素抗性基因)。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型,如用于保存序列信息的克隆质粒(如:pUC 系列质粒),用于表达蛋白的质粒(如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒),用于基因编辑的质粒(如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
) 克隆困难怎么办? 对于大片段载体构建实验而言,难点在于片段扩增效率低、重组 / 连接困难、质粒稳定性差、容易发生断裂等。需针对这些痛点,从技术路线选择、实验细节优化两方面制定策略,具体方案如下: ①建议首先选择「分段克隆 + 拼接」 策略,降低连接难度; ②大片段克隆的关键在于长片段的扩增,所以需要从源头保证实验成功率,即保证模板完整度,在扩增前确保模板未发生降解;其次优化 PCR 体系,比如选择长片段专用 PCR 酶,通过梯度测试选择最佳模板上样量及退火温度等; ③避免高拷贝载体(如 pUC
summityoung 那位学长有ISRE质粒,谢谢。我有多种质粒可以交换 zfv2007 Do you have any lentivirus plasmid? zhujoker 我有,就是具有IRES启动子的质粒吗? 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
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