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999
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亦高生物
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9003-99-0
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P6782-25MG

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文献和实验一.实验目的 学习一种人工合成模拟过氧化物酶的方法,了解柱子型固定酶的原理以及感性认识酶分析法的一些应用。 二.实验原理 过氧化物酶的辅基是血红素。在体外将血红素与牛血清白蛋白结合制备成含血红素的蛋白质分子作为模拟过氧化物酶。在确定血红素与牛血清白蛋白结合后,检测其的过氧化物酶活性。然后将此人工模拟酶固定在载体琼脂糖凝胶(Sepharose 4B)上并装柱,应用于检测样品中痕量过氧化氢的含量,因为过氧化氢的测定
试剂:2%儿茶酚溶液。 3%过氧化氢溶液。 试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环,置于洁净试管内,滴加2%儿茶酚溶液1mL及3%过氧化氢溶液1mL。静置于室温(20℃)中30~60min,观察结果。 结果:阳性反应,细菌变为黑褐色;阴性反应,细菌不变色。 注:过氧化物酶的作用可受氰化钾的抑制。 (责任
2 O A 一般在植物界中广泛存在,但在动物组织中存在的知道的不多。动物组织的过氧化物酶反应是由血红蛋白附属的过氧化物酶作用而来的。对辣根( Armoracialapathifolia)中的这种酶了解得较多, H. Theorell( 1941)已将其结晶而提纯出来。分子量约 4万 4千,一分子含一个作用基氯高铁血红素。此酶的吸收光谱在 640、 500、 402毫微米处为最大吸收。加入 H2 O2 (或 CH3 OOH)时可见到吸收光谱的变化。这是由于过氧化氢和酶的氯
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