- ￥3870 - 22680
- 西格
- XG-DB2624
- 国产
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
43
- 英文名：
AD 003, Alpha N-terminal protein methyltransferase 1A, C9orf32, Chromosome 9 open reading frame 32, Methyltransferase like 11A, Methyltransferase-like protein 11A, Mettl11a, N-terminal RCC1 methyltransferase, NRMT, NTM1A, NTM1A_HUMAN, NTMT1, X-Pro-Lys N-terminal protein methyltransferase 1A
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
-20°C for up to 1 year
- 规格：
50μg/200ug/1mg
| 规格： | 50μg | 产品价格： | ￥3870.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 200ug | 产品价格： | ￥7200.0 |
| 规格： | 1mg | 产品价格： | ￥22680.0 |
| 货号 | XG-DB2624 | 种属 | Human |
| 宿主 | E.Coli | 表达区间 | 1-223 |
| 分子量 | 24.4 kDa | 标签 | N-terminal His Tag |
| 规格 | 50μg、200ug、1mg | 用途 | 仅供科研实验 |
| 别称：AD 003, Alpha N-terminal protein methyltransferase 1A, C9orf32, Chromosome 9 open reading frame 32, Methyltransferase like 11A, Methyltransferase-like protein 11A, Mettl11a, N-terminal RCC1 methyltransferase, NRMT, NTM1A, NTM1A_HUMAN, NTMT1, X-Pro-Lys N-terminal protein methyltransferase 1A 纯度 Greater than 95% as determined by SDS-PAGE 应用 Western Blot, ELISA 性状 Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution |
重组蛋白的制备方法
● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：
表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。
二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
公司正在出售的产品：
PEA 琼脂 PEA Agar 250g 用于从含革兰氏阴性菌的标本中分离培养革兰氏阳性菌 CSF1R Protein Mouse CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & Fc 标签)
艾格琼脂 Eugonic Agar 250 用于生产过程中无菌监测(Acumedia方法) KLRK1重组食蟹猴 NKG2D / KLRK1 蛋白 (aa 78-216, His 标签) Protein
NTM 培养基 NTM Medium 250 用于淋球菌的分离培养(Quelab方法) MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3 0.5mgMAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3) 自噬微管相关蛋白轻链3抗原
YNB 培养基 YNB Medium 100 用于基因工程中酵母菌的发酵培养 FCGR3B CD16b / FCGR3B 蛋白 Protein
胰蛋白胨 Tryptone 250 培养基原材料，提供细菌生长氮源，含色酸 GUCA1A Protein Human GCAP1 / GUCA1A 蛋白 (His & GST 标签)
酪蛋白胨 Peptone from Casein 250 干酪素胰酶水解而成，培养基原材料 PTN Protein Mouse Pleiotrophin / PTN / HB-GAM 蛋白 (Fc 标签)
牛肉浸粉 Beef Extract Powder 250 培养基原材料，提供细菌生长所需的生长因子 HA重组甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签) Protein
细菌琼脂粉 Agar Bacteriological 250 培养基原材料，培养基凝固剂 phospho-NFKB p65 (pSer536 0.5mgphospho-NFKB p65 (pSer536) peptide 0酸化细胞核因子/0酸化k基因结合核因子抗原
植物（大豆）蛋白胨 Peptone from Soybean Meal 200 培养基原材料，含碳水化合物，提供细菌生长氮源 CRABP2 CRABP2 蛋白 (His 标签) Protein
Recombinant Human METTL11A细菌蛋白胨 Peptone Bacteriological 250 培养基原材料，提供细菌生长所需的生长因子 GYPA Protein Human GYPA / CD235a / Glycophorin A 蛋白 (His 标签)月示胨 Proteose peptone 250 培养基原材料，为营养要求高的细菌生长提供营养 PVRL2 Protein Human CD112 / Nectin-2 / PVRL2 蛋白 (Fc 标签)
牛心浸粉 Beef Heart Infusion 100 培养基原材料，提供丰富的营养成份 结晶紫染色液 100ml
肝浸粉 Liver Infusion 100 培养基原材料，为营养要求高的细菌提供生长营养成份 TrK A (h-NGFR 0.5mgTrK A (h-NGFR) (p140- TrK A) 神经生长因子的一种(抗原)
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