2×Gold PCR 高保真酶预混液

如何选择qPCR预混液

相关专题   随着定量PCR 在不断改善，多重qPCR同样如此。多重qPCR是将几个PCR分析合在一起，同时扩增并独立检测目标，它在提高通量的同时也节省了样品。与单重qPCR相比，尽管它需要更多时间和精力，但用户得到了丰富的数据。 然而，多重qPCR 并不是单重反应的简单叠加，因为在一个反应管中，任何一个目标的扩增都能影响其他目标的扩增。让反应条件同时适合这么多个目标，这似乎不太容易，但使用qPCR预混液可能有帮助。预混

PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶

酶。 图 1.非特异性扩增（左图）与使用热启动 DNA 聚合酶进行的特异性扩增（右图）。 如何为您的 DNA 聚合酶选择正确的形式 还有更多需要考虑的因素。选择可以简化您工作流程的聚合酶形式。PCR 聚合酶形式的选择包括即用型预混液、用于直接凝胶上样的含染料缓冲液以及用于直接 PCR 分析的所有必要成分的完整试剂盒。 使用预混液，您只需添加模板和引物，然后，开始 PCR 实验。如果您想进一步减少操作步骤，使用含染料缓冲液的聚合酶允许 PCR 产物直接凝胶上样（注意：确保染料与下游应用兼容）。直接

PCR 不必“摸条件”

μL 体系 2× MasterMix 25 μL 上游 Primer （ 10 μM 1-5 μL 下游 Primer （ 10 μM ） 1-5 μL 模板 lamid DNA ～ 50 ng genomic DNA ～ 1000 ng cDNA ～ 500 ng 粗提液 ～ 2 μL 灭菌蒸馏水至 50 μL PCR 扩增实例： 一、plasmid DNA 扩增 1．提取的质粒 DNA 扩增 以pUC19 质粒为模板扩增 100，250，500