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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Seebio® Hotstart Taq DNA Polymerase(Glycerol-free)
- 保质期:
1年
- 供应商:
西宝生物400-021-8158
- 保存条件:
2-8度
- 规格:
1KU
基础信息
| 中文名 | Seebio® 热启动Taq DNA聚合酶(无甘油) |
| 英文名 | Seebio® Hotstart Taq DNA Polymerase(Glycerol-free) |
| 成分 | Seebio® Hotstart Taq DNA Polymerase;10× PCR Buffer |
| Mol. Weight | 94kDa |
产品介绍
| 【产品基本信息和用途】 Seebio® Hotstart Taq DNA Polymerase是通过大肠杆菌重组表达获得的经过化学修饰的Taq DNA聚合酶,适用于Hotstart PCR。化学修饰消除了Taq酶在低温条件下的聚合酶活性,在PCR扩增过程中,95℃ 5min热处理可消除这种修饰,恢复Taq酶活力,由此赋予了酶的热启动活性。热启动性能抑制了在低温条件下由于引物非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。本品具有高灵敏特性,适用于基于DNA模板的PCR扩增和检测,包括细菌、质粒DNA、cDNA以及复杂基因组DNA。 Seebio® Hotstart Taq DNA Polymerase保留了普通Taq DNA Polymerase的5'→3'核酸外切酶活性,可替代普通Taq酶的用途,例如qPCR、PCR等。 【产品特点和优势】 ² 特异性和扩增效率更高,可用更短循环数即可扩增目的片段,同时降低背景 ² 本酶可在更宽泛的Mg2+浓度范围内进行高效扩增,优化扩增条件更方便 ² 可从高复杂模板中扩增2kb靶基因,如人基因组DNA ² 本酶不含甘油,方便冻干等用途 |
| 【储存缓冲液】 |
50mM Tris-HCl (pH 7.5), 250mM KCl, 2.5 mM DTT, 0.25 mM EDTA, 0.1% (v/v) NP-40和0.1% (v/v) Tween20
| 【10×反应缓冲液】 100mM Tris HCl (pH 8.8 at 25°C), 500mM KCl, 15mM MgCl2, 1%Triton X-100 【推荐 PCR 条件】 10×PCR buffer 2μl dNTP Mix(2.5mM) 1.6μl Hotstart Taq DNA polymerase 1μl 模板DNA < 500ng 引物1 0.2-1.0μM (终浓度) 引物2 0.2-1.0μM (终浓度) 补充无菌纯净水至 20μl |
| 【推荐 PCR 程序】 |
| 95℃ 5 min 95℃ 20 sec 50-68℃ 30 sec 25~40 cycles 72℃ 1min/kb 72℃ 5 min 4℃ storage 注意事项:建议冰上配制PCR反应液;最佳PCR条件会随着不同引物的热力学性质的差异而发生变化 |
质量指标
| Activity | ≥5U/μl |
| Appearance | liquid |
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文献和实验Taq DNA聚合酶是从一种水生栖热菌(Thermusaquaticus)yT1株分离提取的.yT是 一种嗜热真菌,能在70~75℃生长.该菌是1969年从美国黄石国家森林公园火山温泉 中分离的. (一)酶活性与热稳定性 该酶基因全长2496个碱基,编码832个氨基酸,酶蛋白分子为 94KDa.其比活性为200000单位/mg.75~80℃时每个酶分子每秒钟可延伸约150个核苷 酸,70℃延伸率大于60个核苷酸/秒,55℃时为24个核苷酸/秒.温度过高(90℃
实验步骤 1. Measure out the amount of Taq DNA polymerase needed. When using a reaction cocktail, determine the total number of units in the mix. 2. Add an amount of “equivalent units” of Platinum® Taq
使用 Platinum® Taq DNA 聚合酶 (Platinum® Taq DNA Polymerase),对靶序列进行定性验证
实验步骤 The procedure on the following page is suggested as a guideline and starting point when using Platinum® Taq DNA Polymerase in any PCR amplification. Optimal reaction conditions (incubation times and temperatures
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