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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Seebio®Hot Star TaqMan Probe qPCR Master Mix(2X)(Universal)
- 保质期:
1年
- 供应商:
西宝生物400-021-8158
- 保存条件:
2-8度
- 规格:
2×500 µl
基础信息
| 中文名 | Seebio®热启动Taq酶探针法qPCR预混液(2X) |
| 英文名 | Seebio®Hot Star TaqMan Probe qPCR Master Mix(2X)(Universal) |
产品介绍
【产品基本信息用途】
Seebio® 热启动 Taq 探针法 qPCR预混液(2X) 利用了一种性能增强的Taq DNA聚合酶,通过热启动激活技术进行保护,并优化了qPCR缓冲系统来更有效进行基于探针法的定量PCR。本混合物在2倍反应浓度下制备,可直接用于稳健、低模板的定量PCR,具有高灵敏度、特异性和可靠性。
【产品特点和优势】
² 所用Taq DNA聚合酶经改构和优化,具有热启动、更高灵敏性和更高可靠性;
² 优化的扩增缓冲系统,保障高的扩增信号强度和低模板有效扩增;
² 2×预混液使反应液配制更方便快捷。
【运输、储存条件和有效期】
干冰运输。-20℃保存,有效期2年
【必备主要试剂和仪器】
1.Real Time PCR 扩增仪
2.实验专用反应管或反应板
3.PCR 引物和荧光探针
4.灭菌水
5.微量移液器和枪头(已高压灭菌)
6.ABI 7300/7500/7500 F/StepOnePlus等扩增仪需ROX Reference Dye。
【使用方法】
1. 配制qPCR反应混合液
| 组分 |
体积(µl/rxn) |
终浓度 |
| 2×探针法 qPCR预混液 |
10 |
1× |
| 模板 |
可变 |
1-100ng |
| 正向引物(5µM) |
1 |
0.2-1µM |
| 反向引物(5µM) |
1 |
0.2-1µM |
| 荧光探针 |
1 |
0.1~0.5µM |
| Rox reference Dye(50×) |
按仪器需要 |
1× |
| dH2O |
至终体积20 |
- |
| 总体积 |
20 |
- |
2. qPCR程序设定
本试剂盒可应用于两步和三步qPCR程序。如果扩增效率较差,则可以延长热启动时间,可以降低退火温度或增加延长时间。如果扩增特异性较差,则可以适当地提高退火温度。
| 二步法 |
变性 |
PCR(40 cycles) |
融解曲线 (1 cycle) |
|||
| 变性 |
退火/延申 |
|||||
| 温度 |
95℃ |
95℃ |
60℃ |
95℃ |
60℃ |
95℃ |
| 时间 |
30s~10min |
15s |
30~60s |
15s |
60s |
15s |
| 三步法 |
变性 |
PCR(40 cycles) |
融解曲线 (1 cycle) |
||||
| 变性 |
退火 |
延申 |
|||||
| 温度 |
95℃ |
95℃ |
50~60℃ |
72℃ |
95℃ |
60℃ |
95℃ |
| 时间 |
30s~10min |
15s |
30s |
30s |
15s |
60s |
15s |
3. 结果分析
扩增曲线:CT值范围一般为15~35,20~28的范围较好。如果CT值过低,则增加模板的稀释率。如果CT值过高,则提高模板或引物的浓度,甚至调整qPCR程序。
质量指标
MSDS
-
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相关资料
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产品说明书
-
COA报告
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文献和实验TaqMan Primer and Probe Design
Adapted from TaqMan® One-Step RT-PCR Master Mix Reagents Kit Instruction Design of Probes Keep the G-C content in the 20 to 80% range. Avoid runs of an identical nucleotide. This is especially true for guanine, where runs
,切除标签,并通过质谱仪检测。如果你们实验室没有质谱仪,而又想开展多重分析,那么下面的一些方案可能适合你。 罗氏应用科学部的Light Cycler 480 Probes Master Mix能成功支持4重反应,甚至达到5重。这是一种即用型的反应预混液,包含了FastStart Taq 热启动型DNA聚合酶,它能减少非特异产物的形成,从而显著改善PCR的特异性和灵敏度。 Bio-Rad的iQ Multiplex Powermix能检测最多4个目标,即使它们的表达量相差106倍
【公告】创英生物TaqMan-MGB双标记荧光探针合成 --VIP 客户专属
Probe qPCR Master Mix-PMXP (with ROX) 400 Reactions(20μL体系,共2mL) 1900元 PMXM Probe qPCR Master Mix-PMXM (NO ROX
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