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北京义翘神州科技股份有限公司
- 服务名称:
酶蛋白开发及检测方法开发服务
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酶蛋白检测方法开发服务
激酶是一类能够将磷酸基团从ATP转移到另一种分子上酶,包括蛋白激酶、脂质激酶和碳水化合物激酶等。其中,蛋白激酶是细胞信号转导中扮演关键角色,调节细胞增殖、分化、代谢、生存和迁移等过程。激酶信号通路的异常与癌症、心血管疾病、神经退行性疾病和代谢紊乱等多种人类病理状态有关。因此,深入研究激酶对于揭示这些疾病的发病机制、开发新疗法和设计靶向药物至关重要。
SignalChem Biotech(义翘神州全资子公司)的活性激酶产品线在全球范围内的覆盖率处于行业领先地位,可以提供广泛的高纯度、高活性的重组蛋白激酶和脂质激酶,以支持您的学术研究和药物发现工作。我们建立了严格的质量控制测试,以满足激酶研究人员对项目一致性和可靠性的要求。此外,SignalChem还可以提供酶蛋白检测方法的开发服务,凭借在酶蛋白研究、开发和生产方面超过20年的专业知识和经验积累,我们可根据您的个性化或高难度项目需求精准定制,提供最佳解决方案。
我们的服务包括:
• 高生物活性的酶蛋白生产,可提供全长或片段蛋白,以及带标签和无标签的形式;
• 为靶蛋白定制开发检测方法;
• 通过与已知的抑制剂对比,对创建的检测方法进行全面验证;
• 确定靶蛋白的动力学参数。
服务优势
服务流程

服务内容
定制酶蛋白开发策略
周期:最快4周,平均6-8周

特色检测平台
周期:具体时间取决于待检测蛋白和检测平台。预计现有检测平台需要1-2周,开发新的检测平台需要4周以上。

服务案例
酶蛋白及检测方法开发服务常见问题解答
除HIS和GST外,可否使用其他蛋白标签?
我们可以定制其他标签(如FLAG和Fc)融合蛋白。
可否定制无标签蛋白?
我们可以根据您的需求定制无标签蛋白。
为什么SignalChem的重组蛋白有些在大肠杆菌细胞中表达,而有些则在Sf9昆虫细胞中表达?
需依据目的蛋白的功能和应用选择表达系统。昆虫细胞(如Sf9)提供类似哺乳动物细胞的翻译后修饰,表达的重组蛋白在结构上更接近天然蛋白、具有生物活性。而大肠杆菌缺乏真核表达系统对蛋白进行的翻译后修饰加工,表达产物可能仅具有最低限度的基础活性、往往不及Sf9昆虫细胞生产的重组蛋白的活性。
SignalChem的酶蛋白适合用于晶体学研究吗?
SignalChem的活性酶蛋白经过了体外活性验证,酶蛋白开发服务可高度定制化,例如提供额外的纯化步骤、缓冲液置换、和标签修饰等,满足蛋白晶体学研究等其他应用的要求。
请问激酶优化反应时怎么选择最佳底物浓度?与Km有什么关系?
通常我们所说的激酶反应的底物指的是磷酸基团的受体多肽。由于大多数的激酶抑制剂化合物和多肽底物对与激酶的结合并无竞争性,因此抑制剂的抑制效力并不会受到底物浓度的显著影响。在这种情况下,合适的底物浓度应该设置为远高于底物的Km值,从而可以确保反应动力学不会因为底物的消耗而发生变化。一个相对简单的确定合适底物浓度的方法是,在反应终止时,底物浓度的降低不应超过初始浓度的20%。
如何计算蛋白质的浓度?
我们每种蛋白产品的浓度都是通过在 SDS-PAGE 凝胶上使用牛血清白蛋白(BSA)或牛γ球蛋白(BGG)的标准曲线进行滴定计算得出的。
是否能使用你们的蛋白质作为ELISA检测的校准物?
SignalChem的蛋白可以用作校准物。需要注意的是,如果您使用GST标记的蛋白质,请确保使用GST蛋白作为对照。
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文献和实验研究要全面完整。 感觉茅塞顿开,只是经费紧张,又想发篇好点的文章。 fghostyun 一般表达谱也就两三千左右一个样本,做蛋白用抗体进口的也要几千吧,据我所知,激酶检测试剂盒应该也不便宜。楼主如果想快点发文章的话,这应该算是一种选择吧。最近一直帮医院客户做这些,觉得你的研究跟他们很类似,有感而发。 364587256 wangch84 wrote: 你可以在NCBI
特异性的选择主要需要考虑四个方面:蛋白特异性、种属特异性、实验方法特异性、标记物的特异性。 (1)蛋白特异性 针对需要检测的蛋白查找抗体,几个细节要区分,重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测,对抗体的要求是不一样的,注意查看抗体说明书的检测说明。如果重组蛋白不是全长表达,则需要注意抗体的免疫原区域是否在重组蛋白区域内。内源性蛋白最好能清楚其剪切与修饰的方式,特殊表型的蛋白需要进行序列比对,并结合抗体免疫原序列,查看交叉反应的情况。磷酸化蛋白检测需要确定具体位点,不同位点的磷酸化意味
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