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- 2025年12月30日
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个样本
小分子药物载药（超声法）
一、实验流程
1.超声法载药
2.HPLC检测：HPLC检测小分子药物装载效率。
3.外泌体鉴定
（1）粒径和电位检测：粒径检测外泌体的大小和电位。
（2）电镜检测：透射电镜检测外泌体的形态。
（3）WB检测：检测外泌体指标CD9/CD81/CD63/TSG101/HSP70等表达情况。
4. 外泌体稳定性实验：放置-80℃前后的粒径大小及电位变化。（可选做）
5. 外泌体释放实验：比如将新鲜制备的ExoPTX在室温下置于PBS中搅拌，取不同时间点的上清，HPLC分析。（可选做）
二、示例图：
图一：外泌体载药前后鉴定结果透射电镜结果；粒径结果；Western blot结果；电位结果
图二：小分子药物HPLC检测结果
三、参考文献：
[1] Wang P, Wang H, Huang Q, Peng C, Yao L, Chen H, Qiu Z, Wu Y, Wang L, Chen W. Exosomes from M1-Polarized Macrophages Enhance Paclitaxel Antitumor Activity by Activating Macrophages-Mediated Inflammation. Theranostics. 2019 Feb 28;9(6):1714-1727. doi: 10.7150/thno.30716. PMID: 31037133; PMCID: PMC6485189.
[2] Liu H , Shen M , Zhao D , et al. The Effect of Triptolide-Loaded Exosomes on the Proliferation and Apoptosis of Human Ovarian Cancer SKOV3 Cells[J]. BioMed Research International, 2019, 2019:1-14.
[3] Kim MS, Haney MJ, Zhao Y, et al. Development of exosome-encapsulated paclitaxel to overcome MDR in cancer cells. Nanomedicine. 2016 Apr;12(3):655-664.
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文献和实验将外泌体提取纯化，再将治疗药物包载于外泌体中，其优点是制备简易。目前，常用的外源性载药方法包括电穿孔法、共孵育法、超声法、化学转染法及反复冻融法。然而，外源性药物装载也存在一定缺陷，如在装载过程中可能会破坏外泌体的完整性，并且需要额外的纯化步骤来去除未被外泌体捕获的药物。另一种为内源性载药途径，即通过基因工程技术处理或共孵育，将目标分子（如核酸、蛋白和化学药物）先引入供体细胞，再包装进外泌体中，随后外泌体从供体细胞分泌，最后通过分离提纯回收已载药的外泌体。内源性载药的优点是保留了外泌体的完整性和功能
水果也会用纳米技术？因能治疗癌症，还登上 Nature 和 Cell 子刊！
颗粒在葡萄柚中含量最大，可达到 2.21 克每公斤。这意味着通过种植水果，我们可以获得大量制备此类纳米载体。更神奇的是，作者观测到，葡萄柚纳米载体（GNVs）能够进入造血细胞以及非造血细胞内，并且呈现出剂量相关性，这提示了 GNVs 搭载药物的潜力。同样，在向小鼠静脉或者腹腔注射了带有标记的 GNVs 后，作者成功在多种重要的脏器中检测到了 GNVs，而且 GNVs 在各个脏器的富集与用于药物递送的纳米颗粒相似。但与人造纳米颗粒不同的是，GNVs 无法穿过胎盘，这意味着 GNVs 的应用范围很有可能
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