11995065赛默飞DMEM高糖含丙 酮酸盐Thermo哺

类器官培养与应用——肠类器官

R-spondin 1 - - - - 500ng/ml CX83 EGF - - - - 100ng/ml C029   hPSCs培养和传代 1、将冻存的 Matrigel 在 4°C 下过夜解冻，在 6 孔板的每孔滴加 1ml 冷的 Matrigel，旋动 6 孔板使 Matrigel 溶液分布均匀。随后转移至 37℃ 条件下孵育 10min 使其凝固，使用前需室温静置 1h。 2、将 hPSCs 接种在包被 Matrigel

小心翼翼还是养不好细胞？师兄说了一个让我惊呆的原因

细胞培养基成分复杂，包括盐类、糖类、维生素、氨基酸、代谢前体、生长因子、激素和微量元素。对这些物质的需求因细胞而有差异，这也导致大量的不同培养基配方出现。主要碳源物质通常是葡萄糖，有时也会使用半乳糖代替，这是因为半乳糖的代谢速度较慢。氨基酸（尤其是 L - 谷氨酰胺）和丙酮酸盐也可作为碳源。除了营养成分，培养基也会帮助维持培养体系的 pH 和渗透压。pH 的维持依靠一种或多种缓冲液体系，最常见的包括 CO2/NaHCO3、磷酸盐和 HEPES 等，血清也可以作为完全培养基的缓冲液（文章末尾会送

鸡卵泡颗粒细胞分离、培养

0.2%Ⅱ型胶原酶，重悬沉淀，置于37℃恒温水浴锅中消化30min，每5min震荡一次； F. 消化结束，加入4mL M199完全培养基（含10%血清）终止消化；用200目不锈钢筛过滤，收集滤液，1200rpm离心5min； G. 沉淀用M199洗2次，室温离心，1200rpm，5min；弃上清，加入M199完全培养基（含5%FBS及1%双抗）重悬后接种于6孔塑料培养皿，置于37℃、5%CO2培养箱内静置培养；12-24h首次换液，随后每天观察，2-3天换液一次，待细胞生长融合