11330032赛默飞DMEM/F-12 HEPES The

细胞培养大攻略

Pluronic Poly-all。 28、High Five细胞用多大的密度冻存？ 3.0x106 cells/ml 29、在我的果蝇培养基中发现形成白色沉淀，加热后溶解。它是什么？对我的细胞有害吗？ 可能是谷氨酰胺沉淀，但是更可能是L-酪氨酸沉淀。培养基中谷氨酰胺的浓度比典型的2 mM高6倍。酪氨酸的浓度比在RPMI 1640中高25倍，而且比谷氨酰胺更加难以溶解。沉淀也可能是不止一种成分的复合物。它可能是由于贮存在局部温度较低的地方引起。只要沉淀

Hepes缓冲液配制

色。HEPES有些昂贵，在高浓度时对一些细胞可能有毒。 原则上，HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度CO2培养环境的限制。实际操作中并非如此简单。溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长也是很重要的。HEPES使用方法有两种：（1）HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中，再过滤除菌。每1000ml培养液中加入2.38克HEPES，待溶后用lN NaOH 调pH至7.2，滤过除菌后使用。此时HEPES的使用浓度为10 mmol/L。（2）亦可配成 100 x 贮存液（l mol/L

实用哺乳动物细胞培养手册（下）

。常用的培养基种类及其应用见下表：培养基种类应用细胞RPMI-1640（标准型）主要用于悬浮细胞培养DMEM-高糖（标准型）DMEM-低糖（标准型）IMDMMcCoys 5AM199F10血清平衡盐液体PBS（Phosphate-Buffered Sallines）DPBS（Dulbecco’s Phosphate-Buffered Sallines）标准型成分含量（g/L）CaCl2(anhyd.)(无水氯化钙)0.10KCl0.20KH2PO40.20MgCl2·6H2O0.10NaCl