RNase Inhibitor, Human Placent

RNase Inhibitor, Human Placenta，即Ribonuclease Inhibitor, Human Placenta，中文名为人胎盘RNases抑制剂，是一种大肠杆菌重组表达的人胎盘核糖核酸酶抑制剂(human placental RNase inhibitor)，可以通过非竞争性方式按1:1比例和RNase A、RNase B、RNase C和人胎盘核糖核酸酶(human placental RNase)结合，并抑制这些酶的活性，从而保护RNA不被这些酶降解。

RNase Inhibitor, Human Placenta对RNase A、RNase B、RNase C和人胎盘核糖核酸酶的抑制能力极强，其Ki值低至约为4×10^-14M。通常抗体和抗原的亲和常数仅为10^-6-10^-9M。并且RNase Inhibitor和这些RNA酶的结合是非常快速的，几乎在加入的瞬间就会和这些RNA酶形成复合物从而抑制其酶活性。

RNase Inhibitor, Human Placenta不能抑制RNase I、T1、T2、H、U1、U2、CL3、RNase from Asper`gillus、S1 Nuclease、Taq DNA polymerase、M-MLV reverse transcriptase和SP6、T7、T3 RNA polymerase的的酶活性。

RNase Inhibitor, Human Placenta在pH 5-8范围内保持其RNA酶抑制活性，在pH 7-8时抑制活性最高。RNase Inhibitor维持其活力需要至少在溶液中含有1mM DTT。

本产品N端带有His-tag，反应完成后如有必要，溶液中的RNase Inhibitor, Human Placenta可以通过相应的His抗体检测或通过磁珠、镍柱吸附去除。His标签蛋白的纯化推荐选购碧云天的BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) (P2210/P2218/P2220)或His标签蛋白纯化试剂盒 (耐还原螯合型) (P2226)以及碧云天的BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) (P2233)或His标签蛋白纯化试剂盒 (耐变性剂型) (P2229S)。

本产品与Thermo公司的RiboLock RNase Inhibitor以及Promega公司的RNasin Ribonuclease Inhibitor属于同类产品，都是重组表达的人胎盘核糖核酸酶抑制剂，对于RNase的抑制效果基本一致(参考图1和图2)。

图1. 碧云天的RNase Inhibitor, Human Placenta和同类产品(Competitor RNase Inhibitor)对RNase A酶活性的抑制效果比较。5µg yeast RNA与0或2ng RNase A及8、4、2、1或0U RNase Inhibitor，在100µl的反应体系(50mM MOPS, 5mM MgCl2, pH6.5)中，37ºC孵育15分钟。反应完毕后立即取20µl反应液用1%琼脂糖凝胶进行电泳分析。如图所示，本产品与Competitor公司的产品相比，具有类似的抑制RNA酶活性的效果。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异，图中效果仅供参考。

图2. 碧云天的RNase Inhibitor, Human Placenta和同类产品(Competitor RNase Inhibitor)对RNase A的酶活性的抑制效果比较。2µg Hela细胞总RNA与0或0.5ng RNase A及20、10、5、2.5、1.25、0.625或0U RNase Inhibitor，在20µl的反应体系(50mM MOPS, 5mM MgCl2, pH6.5)中，37ºC孵育15分钟。反应完毕后立即全部用1%琼脂糖凝胶进行电泳分析。如图所示，本产品与Competitor公司的产品相比，具有类似的抑制RNA酶活性的效果。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异，图中所示结果仅供参考。

用途：用于cDNA合成，体外转录，体外翻译，以及mRNA-protein复合物分离纯化等过程中保护RNA不被降解；还可用于特定RNase活性的鉴定等。

来源：由大肠杆菌表达，表达基因的来源为human placenta中编码该酶的基因。

活性定义：将能够抑制5ng RNase A的50%活性的酶量定义为一个活性单位。

活性检测条件：100mM Tris-HCl (pH7.5), 1.2mM EDTA, 0.1mg/ml BSA, 100ng/ml RNase A, 0.1mg/ml E.coli [3H]-RNA, 50mg/ml yeast RNA, 8mM DTT。

纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶。

储存溶液：20mM HEPES-KOH (pH7.5), 50 mM KCl, 5 mM DTT, 50% (v/v) glycerol。

失活或抑制：75ºC加热10分钟可以导致完全失活。70ºC加热10分钟仍会有微量活性残留。SDS和尿素等导致蛋白变性的试剂以及对氯汞基苯甲酸盐(p-chloromercuribenzoate)、重铬`酸钾等氧化剂会抑制RNase Inhibitor与RNA酶的结合。

包装清单：

-20℃保存，两年有效。

使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20ºC保存。

酶储存溶液中加入DTT可保证RNase Inhibitor长期贮存的稳定性。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。