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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
55
- 英文名:
DMEM/F-12(1:1)medium
- 供应商:
上海西格
- 规格:
500ml
| 产品名称 | DMEM/F-12(1:1)培养基(不含15mM HEPES) | 货号 | XG-PYJ8044 |
| 英文名称 | DMEM/F-12(1:1)medium | 产品规格 | 500ml |
| 用途 | 仅供科研实验 | 货期 | 现货 |
制备培养基的基本方法和注意事项:
1,配方的选定:同一种配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据自己的使用目的,加以选用,记录其来源。 2,制备记录:每次制备均应有记录,包括名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,最终ph值,消毒的温度和时间制备的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的一同存放,以防发生混乱。
3,成分的称取:各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,最好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方面军做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后,还应进行一次检查。
4,各成份的混合和溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入其中,使细菌不易生长。最好使用不锈钢锅加热溶化,可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时,可先用温水加热并随时扰动,以防焦化,如发现有焦化现象,该培养基即不能使用,应重新制备。待大部分固体成分溶化后,再用较小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如为琼脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中,因蒸发而丢失的水分,最后必须加以补足。
培养基的使用步骤:
1.琼脂培养基的融化
将培养基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高压锅中的蒸汽)融化。经过高压灭菌的培养基尽量减少重新加热的时间,避免过度加热。培养基融化后立即移开,室温静置片刻(约2min),以免玻璃容器发生破裂。
融化后的培养基放入47℃~50℃恒温水浴锅中保温,冷却到47℃~50℃所需的时间取决于培养基的类型、体积和在水锅里的分装量。融化后内培养基应尽快使用,放置时间一般不超过4h。剩余的培养基固后不得再次融化使用。特 别是灵敏性培养基,应根据相关标准,缩短融化后放置的时间。
将琼脂培养基倒入类似检测培养使用的独立容器中,插入温度计,记录并保存琼脂的融化温度。
加入样品的培养基应将温度调节到44℃~47℃,或按照相关标准调节温度。
2.培养基的脱气
必要时,在使用前将养基放到沸水浴或蒸汽浴中加热15min,加热时松开容器盖子;加热后盖紧盖子,并迅速冷却至使用温度。
3.添加成分的加入
对热不稳定的添加成分应在培养基冷却至47℃~50℃时加入,灭菌的添加成分加入前应冷却至室温,避免冷的液体会造成琼脂凝胶或形成片状物。将添加成分慢加入培养基并充分混匀,尽快分装到待用的容器中。
4.培养基的弃置
所有污染和未使用的培养基的弃置应采用安全的方式,并符合相关法律法规的规定。
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文献和实验phoolishkate:脂质体转染后必须用不含抗生素的培养基吗?我的培养基都加了青链霉素,转染后是不是不能用?丁香园网友applezph认为:由于脂质体转染对细胞存在一定毒性,一般说来转染前的一次传代就应用不含抗生素的培养基,转染后的话我觉得也不应该加青链(我都是这么做的)当然如果对自己的操作实在没有把握的话,我认为你可以考虑试试转染后加,但不要太早,4-6小时换液用无抗生素的,可以24后再换用含抗生素培养基丁香园网友qxlbljys认为:1.做细胞转染时,由于转染介质如脂质体可增加膜的通透
培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养,各种目的无血清培养的首选是AIM V培养基(SFM)。在开始进行新的细胞培养时,可以参考下表所列的条件:细胞系 细胞类型 种 组织 推荐使用的培养基293 成纤维细胞 人 胚胎肾 MEM, 10% 热灭活马血清3T6 成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清A549 上皮细胞 人 肺癌 F-12K, 10%胎牛
相关专题 细胞培养基的配制 细胞培养专题 HEPES是一种非离子两性缓冲液 ,其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。其最大优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的PH值.在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中.大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂,酸性培养液呈橙黄色,碱性培养液呈深红色.HEPES有些昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒. 原则上,HEPES作为缓冲剂可用
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