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- 文献和实验
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- 库存:
57
- 英文名:
Lysozyme Broth Base
- 供应商:
上海联祖
- 规格:
250g
中文名称:溶菌酶肉汤基础
英文名称:Lysozyme Broth Base
产品规格:250g
发货周期:1~3天
产品价格:询价
| 货号 | 规格 | 发货期 | 用途 |
| LZ-PYJ4063 | 250g | 1~3天 | 仅供科研实验 |
添加剂:每瓶需配套添加0.1%溶菌酶溶液使用。
成分(g/L):
牛肉浸粉 3.0
蛋白胨 5.0
pH值6.8±0.1 25℃
用法:称取本品8.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装于烧瓶中,每瓶99ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,每瓶中加入0.1%溶菌酶溶液1ml,混匀后分装无菌试管,每管2.5ml,备用。
注:溶菌酶溶液制备:在65ml灭菌的0.1mol/L盐酸中加入0.1g溶菌酶,煮沸20分钟溶解后,再用灭菌0.1mol/L盐酸稀释至100ml。
培养基操作步骤:
一、用法:称取本品33.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,备用。
二、配料:首先,根据培养基的配方,准确称量各种成分,包括粉状和非粉状的成分,如肉膏等,放入烧杯中。
三、溶化:向烧杯中加入适量的水,然后搅拌以溶解各成分。对于含有琼脂的培养基,应注意防止外溢,并在溶化过程中保持搅拌。
四、矫正pH:在培养基溶解均匀并冷却至室温后,使用pH试纸测量pH值,然后根据需要加入酸或碱来调整至合适的pH值。
五、澄清过滤:使用滤纸或多层纱布对培养基进行过滤,以去除杂质。
六、分装:将制备好的培养基分装入试管内或三角瓶内,确保管(瓶)口塞上棉塞,以防止外界微生物污染。
七、灭菌:对分装好的培养基进行灭菌处理,通常是通过高压灭菌来确保无菌环境。
八、检定:灭菌后的培养基可以进行质量检定,以确保其符合使用要求。
培养基的计数方法:
一、稀释涂布平板法(亦称活菌计数法)是一种常用的微生物计数方法,其原理是当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,可以推测出样品中大约含有多少活菌。这种方法操作简便,适用于菌体大小和质量都相近的类群,如细菌、酵母菌等的计数。计算公式为每克样品中的菌株数=C/V*M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。
二、显微镜直接计数法利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。这种方法不能区分死菌与活菌,但可以估算出1mL培养中液中细胞个数,计算公式为1mL 培养中液中细胞个数=小方格中细胞平均数×400 ×104×稀释倍数(个/mL)。显微镜直接计数法的缺点是不能区分死菌与活菌,因此计数到的细胞数包括了死亡的细胞数。
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文献和实验(121℃)灭菌15分钟,即可备用。 三、半固体培养基 1、操作方法同固体培养基,但琼脂加入量较少,仅0.3-0.5%。 2、分装试管,灭菌后使试管直立,冷凝后即成半固体培养基 在基础培养基中加入少量琼脂即为半固体培养基,加入高浓度的琼脂就成为固体培养基,因此可以说基础培养基是配置特殊培养基的基础,配置任何培养基它的成分里都一定会含有基础培养基的。常见的微生物基础培养基有营养肉汤、蛋白冻水等等。
的收获可通过离心来进行,而细菌的裂解则可以采用多种方法中的任意一种,这些方法包括用非离子型或离子型去污剂、有机溶剂或碱进行处理及用加热处理等。选择哪一种方法取决于3个因素:质粒的大小、小肠杆菌菌株及裂解后用于纯化质粒DNA的技术。尽管针对质粒和宿主的每一种组合分别提出精确的裂解条件不切实际,但仍可据下述一般准则来选择适当方法,以取得满意的结果。 1)大质粒(大于15kb)容易受损,故应采用漫和裂解法从细胞中释放出来。将细菌悬于蔗糖等渗溶液中,然后用溶菌酶和EDTA进生处理,破坏细胞壁和细胞外膜,再加
基有基础培养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧培养基等。 按照培养基的物理性状可分为液体,固体和半固体三类。 以下介绍常用基础培养基的制备。 (一)肉汤培养基: 制法:称取营养肉汤粉1.8g(含牛肉膏0.3克g,蛋白胨1g、氯化钠0.5g)加入100ml蒸馏水中,用玻棒搅拌加热溶解。按需要分装于三角瓶或试管,瓶口或管口塞棉塞,包装后置高压蒸汽灭菌器内,在0.11Mpa(1.05公斤/厘米2)压力下,温度达1210C,维持15~20分钟。冷却后贴好标签,40C冰箱贮存
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