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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
55
- 英文名:
Lysozyme Broth Base
- 供应商:
上海西格
- 规格:
250g
| 产品名称 | 溶菌酶肉汤基础 | 货号 | XG-PYJ7177 |
| 英文名称 | Lysozyme Broth Base | 产品规格 | 250g |
| 用途 | 仅供科研实验 | 货期 | 现货 |
添加剂:每瓶需配套添加0.1%溶菌酶溶液使用。
成分(g/L):
牛肉浸粉 3.0
蛋白胨 5.0
pH值6.8±0.1 25℃
用法:称取本品8.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装于烧瓶中,每瓶99ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,每瓶中加入0.1%溶菌酶溶液1ml,混匀后分装无菌试管,每管2.5ml,备用。
注:溶菌酶溶液制备:在65ml灭菌的0.1mol/L盐酸中加入0.1g溶菌酶,煮沸20分钟溶解后,再用灭菌0.1mol/L盐酸稀释至1䆻ᆀ䆻
制备培养基的基本方法和注意事项:
1,配方的选定:同一种配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据自己的使用目的,加以选用,记录其来源。 2,制备记录:每次制备均应有记录,包括名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,最终ph值,消毒的温度和时间制备的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的一同存放,以防发生混乱。
3,成分的称取:各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,最好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方面军做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后,还应进行一次检查。
4,各成份的混合和溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入其中,使细菌不易生长。最好使用不锈钢锅加热溶化,可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时,可先用温水加热并随时扰动,以防焦化,如发现有焦化现象,该培养基即不能使用,应重新制备。待大部分固体成分溶化后,再用较小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如为琼脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中,因蒸发而丢失的水分,最后必须加以补足。
培养基的使用步骤:
1.琼脂培养基的融化
将培养基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高压锅中的蒸汽)融化。经过高压灭菌的培养基尽量减少重新加热的时间,避免过度加热。培养基融化后立即移开,室温静置片刻(约2min),以免玻璃容器发生破裂。
融化后的培养基放入47℃~50℃恒温水浴锅中保温,冷却到47℃~50℃所需的时间取决于培养基的类型、体积和在水锅里的分装量。融化后内培养基应尽快使用,放置时间一般不超过4h。剩余的培养基固后不得再次融化使用。特 别是灵敏性培养基,应根据相关标准,缩短融化后放置的时间。
将琼脂培养基倒入类似检测培养使用的独立容器中,插入温度计,记录并保存琼脂的融化温度。
加入样品的培养基应将温度调节到44℃~47℃,或按照相关标准调节温度。
2.培养基的脱气
必要时,在使用前将养基放到沸水浴或蒸汽浴中加热15min,加热时松开容器盖子;加热后盖紧盖子,并迅速冷却至使用温度。
3.添加成分的加入
对热不稳定的添加成分应在培养基冷却至47℃~50℃时加入,灭菌的添加成分加入前应冷却至室温,避免冷的液体会造成琼脂凝胶或形成片状物。将添加成分慢加入培养基并充分混匀,尽快分装到待用的容器中。
4.培养基的弃置
所有污染和未使用的培养基的弃置应采用安全的方式,并符合相关法律法规的规定。
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文献和实验(121℃)灭菌15分钟,即可备用。 三、半固体培养基 1、操作方法同固体培养基,但琼脂加入量较少,仅0.3-0.5%。 2、分装试管,灭菌后使试管直立,冷凝后即成半固体培养基 在基础培养基中加入少量琼脂即为半固体培养基,加入高浓度的琼脂就成为固体培养基,因此可以说基础培养基是配置特殊培养基的基础,配置任何培养基它的成分里都一定会含有基础培养基的。常见的微生物基础培养基有营养肉汤、蛋白冻水等等。
的收获可通过离心来进行,而细菌的裂解则可以采用多种方法中的任意一种,这些方法包括用非离子型或离子型去污剂、有机溶剂或碱进行处理及用加热处理等。选择哪一种方法取决于3个因素:质粒的大小、小肠杆菌菌株及裂解后用于纯化质粒DNA的技术。尽管针对质粒和宿主的每一种组合分别提出精确的裂解条件不切实际,但仍可据下述一般准则来选择适当方法,以取得满意的结果。 1)大质粒(大于15kb)容易受损,故应采用漫和裂解法从细胞中释放出来。将细菌悬于蔗糖等渗溶液中,然后用溶菌酶和EDTA进生处理,破坏细胞壁和细胞外膜,再加
基有基础培养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧培养基等。 按照培养基的物理性状可分为液体,固体和半固体三类。 以下介绍常用基础培养基的制备。 (一)肉汤培养基: 制法:称取营养肉汤粉1.8g(含牛肉膏0.3克g,蛋白胨1g、氯化钠0.5g)加入100ml蒸馏水中,用玻棒搅拌加热溶解。按需要分装于三角瓶或试管,瓶口或管口塞棉塞,包装后置高压蒸汽灭菌器内,在0.11Mpa(1.05公斤/厘米2)压力下,温度达1210C,维持15~20分钟。冷却后贴好标签,40C冰箱贮存
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