- ￥741.90
- 阿拉丁
- 上海
- L397257
- 2026年01月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20°C储存
- 英文名：
LightNing™ EcoRI
- 库存：
期货
- 供应商：
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格：
L397257-1kit
英文名：LightNing™ EcoRI
纯度或规格：EnzymoPure™
SPU：L397257
CAS：-
存储温度：-20°C储存
运输条件：超低温运输
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文献和实验与分子量的对数成反比。要准确地确定DNA片段的大小，必须用分子量标准物同时进行电泳对照。常用的分子量标准是lDNA/EcoRI、lDNA/HindIII、lDNA/EcoRI+HindIII的酶切片段 实验材料和试剂 (一)实验材料 实验二提取的质粒 pUC118 (二)试剂 1.限制性内切酶 BamHI 2.l DNA/HindIII分子量标准 3.双蒸馏无菌水
分。Target preparation 总共用250ngDNA ，用20单位的限制性内切酶EcoRI、BglII 或者 XbaI ( New England Biolabs(NEB)) 在37度消化4小时。在75度热失活20分钟，消化后的DNA 同0.25 μM 的接头和DNA 连接酶在标准连接缓冲液（NEB）中16度共同孵育4小时。然后在95度孵育5分钟热激活酶。通过扩增连接了接头的DNA 来扩增靶目标，PCR缓冲液II(Perkin Elmer)包含2.5 mM MgCl2 、250μM dNTP
，GenbankDatabase。由于抗体基因编码FR区的部分比编码CDR区的部分要保守，因此可以将引物设计为FR区的互补序列。 针对抗体不同亚族其FR区序列也不尽相同的特点，本室设计了一组引物以确保不会漏掉某一亚族。选择与FR1区段互补的序列作为5’端引物，选择与FR4互补的序列作为3’端引物。扩增的产物是VH或VL基因。为了便于基因克隆，还在引物外侧加上了合适的酶切位点，重链是XhoI-SpeI，轻链是XbaI-EcoRI。 这些酶所识别的序列经计算机检索，证明很少或几乎不在抗体可变区基因
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