快速内切酶XhoI，EnzymoPure™，阿拉丁

噬菌体展示抗体库构建目的基因的获得PCR引物的设计

，GenbankDatabase。由于抗体基因编码FR区的部分比编码CDR区的部分要保守，因此可以将引物设计为FR区的互补序列。 针对抗体不同亚族其FR区序列也不尽相同的特点，本室设计了一组引物以确保不会漏掉某一亚族。选择与FR1区段互补的序列作为5’端引物，选择与FR4互补的序列作为3’端引物。扩增的产物是VH或VL基因。为了便于基因克隆，还在引物外侧加上了合适的酶切位点，重链是XhoI-SpeI，轻链是XbaI-EcoRI。 这些酶所识别的序列经计算机检索，证明很少或几乎不在抗体可变区基因

细菌16S、23S分子鉴定

Restriction fragment length polymorphism)通过PCR扩增分枝杆菌染色体上一段DNA，将扩增产物经限制性内切酶消化，将消化的样品进行琼脂糖凝胶电泳分析，不同分枝杆菌酶切片段的数量或大小不同，电泳图谱呈现多态性。如对16-23srDNA基因PCR扩增，扩增片段（350bp）经识别4个碱基序列的限制性内切酶HaeⅢ、MPPI酶切消化后进行分析，可以鉴别不同分枝杆菌复合群。对分枝杆菌属特异的16srDNA片段PCR扩增，所得DNA片段(1500bp)经CfoI,MboI,RsaI

重组质粒构建

于与质粒和DNA片段的酶切效果。一般情况下，都在通用缓冲液中进行双酶切，但这两种酶在通用缓冲液中酶切效率不一样，这可能导致部分的单缺口的质粒片段存在，这样，在连接反应中，即使在外源DNA片段存在下，这种单缺口的质粒片段能够进行更快速有效自我连接。最终结果是大量假阳性的菌斑生长。对照连接反应中，在不加入外源片段情况下，实验结果如果有菌斑生长，说明双酶切不充分，质粒DNA必须重新进行双酶切。 实验案例分析2：本人曾用XhoI和HindIII酶切位点构建重组质粒，对质粒进行双酶切后，直接就做