快速内切酶XbaI，EnzymoPure™，阿拉丁

关于SNP与神经生物学起始研究的一种工具

分。Target preparation 总共用250ngDNA ，用20单位的限制性内切酶EcoRI、BglII 或者 XbaI ( New England Biolabs(NEB)) 在37度消化4小时。在75度热失活20分钟，消化后的DNA 同0.25 μM 的接头和DNA 连接酶在标准连接缓冲液（NEB）中16度共同孵育4小时。然后在95度孵育5分钟热激活酶。通过扩增连接了接头的DNA 来扩增靶目标，PCR缓冲液II(Perkin Elmer)包含2.5 mM MgCl2 、250μM dNTP

噬菌体展示抗体库构建目的基因的获得PCR引物的设计

，GenbankDatabase。由于抗体基因编码FR区的部分比编码CDR区的部分要保守，因此可以将引物设计为FR区的互补序列。 针对抗体不同亚族其FR区序列也不尽相同的特点，本室设计了一组引物以确保不会漏掉某一亚族。选择与FR1区段互补的序列作为5’端引物，选择与FR4互补的序列作为3’端引物。扩增的产物是VH或VL基因。为了便于基因克隆，还在引物外侧加上了合适的酶切位点，重链是XhoI-SpeI，轻链是XbaI-EcoRI。 这些酶所识别的序列经计算机检索，证明很少或几乎不在抗体可变区基因

PCR技术应用一：诊断单基因疾病

纤维变性病、Huntington氏 病、神经纤维瘤等诊断就属上述情况。这些病例的基因诊断完全依赖于用与疾病位点 连锁的DNA多态性(RFLPs）对患者家族听致病基因进行追踪来完成。当重要DNA多态性 序列周围的DNA序列已知时，应用PCR方法可以很简便地知道重析内切酶位点的存在及 丢失。 　　Mullis和Faloona首先用DNA多态性PCR分析法诊断镰状红细胞贫血，Kogan等用此 法诊断甲型血友病，但文献表明应用PCR分析多态性位点周围序列有潜在的局限性， 因多态性位点XbaI可以在同一基因组的其它部位复制