双链DNA酶，EnzymoPure™, ≥90%，阿拉丁

产品组成

产品简介

dsDNase 是一种核酸内切酶，能够裂解 DNA 中的磷酸二酯键， 生成带有 5'- 磷酸和 3'- 羟基末端的寡核苷酸。dsDNase 能够特异性的消化双链 DNA（double-stranded DNA, dsDNA）而不会消化单链 DNA、引物、探针和 RNA。dsDNase 具有热敏感性，可在 55℃条件下快速失活。dsDNase 主要用于反转录实验前快速去除 RNA 样本中的基因组 DNA 污染，与传统的使用 DNase I 去除基因组 DNA 污染 的方法相比，无需额外加入 EDTA 失活，可减少对 RNA 的损伤，同时节省实验时间，保证 RNA 水平定量的准确性。

活性定义

根据 Kunitz 实验方法，在 25℃ pH 5.0 的条件下，以过量的大分 子 DNA 为底物，在 260 nm 波长处每分钟能引起吸光度增加 0.001 的 酶量定义为 1 个活性单位（U）。

储存缓冲液

25 mM Tris-HCl (pH7.5，@25℃ ), 2.0 mM MgCl2, 10 mM NaCl, 0.01 % (v/v) Triton X-100, 50 % (v/v) glycerol。

抑制与失活

抑制条件：金属离子、EDTA、SDS、DTT、β- 巯基乙醇、高盐 离子浓度等会抑制 dsDNase 的活性；失活条件：55℃温育 5 min。 

质量控制

蛋白质纯度：通过 SDS-PAGE 并考马斯亮蓝染色，该酶纯度 ≥90%。

RNA 酶活性检测：将酶液与 RNA 底物 在 37 温育 1 h，通过凝胶电泳检测没有发现 RNA 底物降解。

功能检测：该产品被用于测试去除来自 RNA 样本中的基因组 DNA 并进行了 RT-qPCR 扩增，发现去除率 ≥99.9%。RNA 数量不受 dsDNase 处理的影响。

使用方法

1. 于冰上配制如下反应体系：

2. 轻轻吹打混匀反应体系后，将以上混合液在 37℃温育 2~5 min； 3. 65℃热失活 2 min，迅速将获得的 RNA 置于冰上，用于后续实验。 长期保存请置于 -80℃，避免反复冻融。 注意事项 1. 若 RNA 样本下游用于 RT-PCR，且目的基因长度 ≥3 kb，失活步骤前 需添加终浓度为 10 mM 的 DTT； 2. 为避免 RNA 降解，可在反应体系中加入适量的 RNase Inhibitor。

常见问题