2xGoldStar MasterMix (Dye)，阿拉丁

　2×GoldStar MasterMix是由GoldStar DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+ 、dNTPs 及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，预混好的PCR混合液使操作更加简单快捷， 可最大限度地减少人为误差和污染。该产品所含有的GoldStar DNA Poly- merase是 一种经化学修饰的、全新高效Taq DNA Polymerase，在常温下酶的活性被完全封闭， 使得该酶在低温或常温下没有活性，从而有效避免在常温条件下由引物和模板非特异 性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特 的缓冲体系使酶的应用更为广泛，使GC含量高、二级结构复杂以及低拷贝的模板，均 能高效扩增，特有的MasterMix配方使整个反应体系稳定性更强。本产品已加入染料（ 蓝色），反应结束后可直接进行电泳检测。用本品进行PCR扩增，PCR产物3'末端附 有一个“A”碱基，可直接用于T/A克隆。本产品特异性强，PCR扩增后无需胶回收去除 杂带，可直接用于下游克隆或芯片杂交等实验。主要应用于常规的PCR、RT-PCR和 多重PCR，特别适用于对特异性要求较高的PCR反应。

质量控制

经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残留DNA；能有效扩增人基因组 中的单拷贝基因；2-8°C存放三个月，无明显活性改变。 

使用方法

以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实 际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。 

1. PCR反应体系

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0 μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引 物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2. PCR反应条件  

注意： 

1）一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，退火时间一般为30-60 s，无法得到理 想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条 件。 

2）延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所包含的GoldStar Taq DNA Polymerase的 扩增效率为1-2 kb/min。 

3）可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太 多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。 

4）本产品须在预变性95℃，10 min条件下实现酶的活化。