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大量
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天根生化科技(北京)有限公司
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400U
产品简介
表观遗传学是研究基因的核苷酸序列不发生改变的情况下,基因表达和调控的可遗传变化的一门遗传学分支学科。表观遗传的现象很多,比如RNA介导的基因沉默、组蛋白修饰等。在高等真核生物中一个主要的表观遗传学机制是DNA的甲基化。
本产品是特别针对通过PCR方法研究基因组DNA甲基化特点的客户所开发的试剂盒。试剂盒组分简单,包含MSP DNA Polymerase,10×MSP PCR Buffe和dNTPs。其中,MSP DNA Polymerase是采用抗体修饰的耐热聚合酶,10×MSP PCR Buffer是特别为MSP反应所优化的PCR缓冲液。本产品具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。适于与TIANGEN重亚硫酸盐处理试剂盒(DP215-02)搭配使用。
产品组成
1. 10×MSP PCR Buffer:
500 mM Tris-HCl (pH8.8)
200 mM KCl
15 mM MgCl2
其它稳定剂和增强剂
2. MSP DNA Polymerase(2.5 U/µl)
质量控制
SDS-PAGE检测纯度大于99%;经检测无外源核酸酶活性;能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
使用说明
本产品使用方便快捷,能避免PCR操作过程中的污染,使用时只需取适量MSP DNA Polymerase,10×MSP PCR Buffer和dNTPs ,同时加入模板和引物,并加入ddH2O补足体积,使MSP PCR Buffer的浓度为1×即可进行反应。
适用范围
本产品适用于甲基化特异性PCR(MSP)方法分析基因组DNA的甲基化特点。
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文献和实验2.2.10 DNA微阵列法 Yan等2001年[40]将以分子杂交为基础的微阵列技术应用于DNA甲基化检测中,这种方法是基于杂交的寡核苷酸微阵列,是一种在基因组中寻找新位点的方法。包括用于整个基因组范围内扫描的差异甲基化(DMH)杂交(Huang等1999年[41])和用于检测某个位点的甲基化特异性微阵列MSO(Gitan等2002年[42])。前者类似于mRNA表达谱或cDNA微阵列,是CpG岛微阵列,后者类似于寡核苷酸微阵列,是针对CpG二核苷酸位点的甲基化特异性寡核苷酸微阵列[26
转移酶法[22] SssI甲基转移酶能够催化DNA的CpG位点发生甲基化。3H-S-腺苷甲硫氨酸(3H-SAM)在SssI甲基转移酶催化作用使基因组DNA的CpG位点发生甲基化。通过测定剩余的放射性标记的SAM即可得到原基因组整体甲基化水平,即测到的放射性强度与所测DNA甲基化水平成反比。这种方法的缺点是所使用的SssI甲基转移酶不稳定,致结果不够精确。 2.1.3 免疫化学法[23] 这种方法是基于单克隆抗体能够与5mC发生特异性反应。应用荧光素标记抗体使之与预先已固定在DEAE膜上的样品DNA特异性
。 2.1.2 SssI 甲基转移酶法[22] SssI甲基转移酶能够催化DNA 的CpG位点发生甲基化。3 H-S-腺苷甲硫氨酸(3 H-SAM)在SssI甲基转移酶催化作用使基因组DNA 的CpG位点发生甲基化。通过测定剩余的放射性标记的SAM即可得到原整体甲基化水平,即测到的放射性强度与所测DNA 甲基化水平成反比。这种方法的缺点是所使用的SssI甲基转移酶不稳定,致结果不够精确。 2.1.3 免疫化学法[23] 这种方法是基于单抗体能够与5m C发生特异性反应。应用荧光素标记抗体使之与预先











