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文献和实验,然后第二天用 NucView 550 (Biotium) 施用不同浓度的星形孢菌素(STS)。NucView 550 是 caspase-3 荧光探针,死细胞核用红色荧光染色。用 STS 和 NucView 550 处理后,将 HT-29 微球用 4% 多聚甲醛固定并用 0.5%Triton X-100 / PBS(-)通透性处理。微球的细胞核在 4°C(39.2°F)下用 Hoechst 33342 过夜染色。染色后,用 SCALEVIEW-S4 将微球透明化。 成像和分析 我们使用 FV
Hoechst 33258染色1.原理 Hoechst 33258和Hoechst 33342均为非嵌人性荧光染料。它们在活细胞中 DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合。活细胞或固定细胞均可从低浓度溶液中 摄取该染料。从而使细胞核着色。故又把此类染料称为DNA探针。Hoechst 33342和Hoechst 33258均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechsr-DNA的激发和发射波长分别550nm和460nm。在荧光显微镜紫外光激发时,Hoechst-DNA发出亮蓝色荧光
AO / EB原理与流程zhongyisheng:1、原理:吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者形态迥然相异,很易判别。在荧光显微镜下观察,可见四种细胞形态:活细胞(VN),核染色质着绿色并呈正常结构;早期凋亡细胞(VA),核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状;非凋亡的死亡
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